肿瘤的细胞免疫治疗 (1)

国夕卜医学免疫学分册２００４年第２７卷第４期　Ｆｏｒｅｉｇｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ１Ｓｅｃｔｉｏｎ　ｏｆｌｍｍｕｎｏｌ０盯，Ｊｕｌｖ　２００４，Ｖｏ１．２７，Ｎ０．４　·１９７·　６　ＸｉａｏＷＢ．Ｌｉｕ　ＹＬ．Ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆＣＤ８＋ＣＤ２８一Ｔ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　ｃｅｌｌｓｉｎ　ｒａｔ　ｍｏｄｅｌ　ｏｆｉｍｍｕｎｅｒｅｓｐｏ．ｓｅ￣［Ｊ］．ＨｕｍＩｍｍｕｎｏｌ，１９９９，６０（７）：５３３—５６１．　１５　Ｃａｎｃｅｄｄａ　Ｃ，Ｆｉｌａｃｉ　Ｇ．Ｐｕｐｐｏ　Ｆ．ｅｔ　ａ１．Ｉｍｍｕｎｅ　ＨｏｍｅｏｓｔａｓｉｓＲｅｑｕｉｒｅｓ　Ｓｅｖ·　ｏｆ　ｃｏｌｉｉｔｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　２，４－ｄｉｎｉｔｒｏｌｆｕｏｍｂｅｎｚｅｎｅｌＪ］．Ｗｏｒｌｄ　Ｊ　Ｇａｓｔａ　ｏｅｎｔｅｍｌ，　２０ｏ３，９（１１）：２＾Ｓ２８．２５３２．　７　Ｎａｋａｍｕｒａ　Ｔ，Ｓ０ｎｏｄａ　ＫＨ，Ｆａｕｎｃｅ　ＤＥ，ｅｔ　ａ１．ＣＤ４　ＮＫＴ　ｃｅｌｌｓ，ｂｕｔ　ｎｏｔ　ｃｏｎ—　ｖｅｎｔｉｎａｏｌ　ＣＤ４　Ｔ　ｃｅｌｌｓ．ａｒｅ　ｒｅｑｕｉｒｅｄｔｏ　ｇｅｎｅｒａｔｅ　ｅｆｆｅｒｅｎｔ　ＣＤ８　Ｔ　ｒｅｇｕｌａｔｏ—　ｅｒａｌ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃ　Ｆａｃｔｏｒｓ　Ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　Ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ　Ｈｏｒｍｏｎｅｓ［Ｊ］．Ａｎｎ　Ｎ　Ｙ　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ。２０ｏ２．９６６：４９－６３．　１６　ｎｌａｃｉ　Ｇ，Ｂａｃｉｌｉｅｒｉ　Ｓ，ＦｒａｖｅｇａＭ．ｃｔ　ａ１．Ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ　ｏｆＣＤ８＋Ｔ　Ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ　ｙｒ　ｅｌｃｌｓ　ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ　ａｎｔｉｇｅｎ　ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　ａｎ　ｉｍｍｕｎｅ—ｐｒｉｖｉｌｅｇｅｄ　ｓｉｔｅ［Ｊ］．Ｊ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，２０ｏ３，１７１（３）：１２６６—１２７１．　８　Ｈａｒｔｍａｎｎ　Ｅ．Ｗｏｌｌｅｎｂｅｒｇ　Ｂ，Ｒｏｔｈｅｎｆｕｓｓｅｒ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｆｕｎｃ—　ｔｉｏｎａｌ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ－ｉｎｔｉｈａ＇ａｔｉｎｇ　ｐｌａｓｕｍｃｙｔｏｉｄ　ｄｅｎｄｒｉｉｔｃ　ｃｅｉｌｓ　ｉｎ　ｈｅａｄ　ａｎｄ　Ｃｅｌｌ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　Ａｃｔｉｖｅ　Ｓｙｓｔｅｍｉｃ　ｌ￣ｐｕｓ　Ｅｒ，Ａｈｅｎｍｔｓｅｕｓ［Ｊ］．　Ｊ　ｌｍｍｎｏｌ，２ｏ０１，１６６（１０）：６４５２－６４５７．　１７　Ｎａｊａｆｉｎ　Ｎ．Ｃｈｉａｔｎｉｓ　Ｔ，Ｓａｌａｍａ　ＡＤ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅｇｕｌｔａｏｒｙ　ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ＣＤ８　ＣＤ２８一Ｔ　ｃｅｌｓ　ｉｎ　ａｒＬ　ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｍｏｄｅｌ［ｊ　Ｊ，Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｉｎｖｓｅｔ，２００３，　１１２（７）：１０３７．１０４８．　１８　ｌｅｗｉｓ　ＤＥ，Ｔａｎｇ　ＤＳ，Ｏｐｐｏｎｇ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ａｎｅｒｇｙ　ａｎｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎ　ＣＤ８　Ｔ　ｎｅｃｋ　ｃｎｃａｅｒ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２００３，６３（１９）：６４７８－６４８７．　９　Ｃｏｒｔｅｓｉｎｉ　Ｒ，Ｒｅｎｎａ·Ｍｏｌａｊｎｉｏ　Ｅ，Ｃｉｎｔｉ　Ｐ，ｅｔ　１．ａＴａｉｌｏｒｉｎｇ　ｏｆｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓ—　ｓｉｏｎ　ｉｎ　ｒｅｎａｌ＂，ｏｒｄ　ｌｉｖｅｒ　ａｌｌｏｇｒａｆｔ　ｒｅｃｉｐｉｅｎｔｓ　ｄｉｓｐｌａｙｉｎｇ　ｄｏｎｏｒ　ｓｐｅｃｉｉｆｃ　Ｔ－ｓｕｐ—　ｅｌｃｓ　ｆｒｏｍ　ｍＶ—ｉｎｆｅｃｔｅｄ　ｅｒｐｓｏｎ［Ｊ］．Ｊ　ｉｍｍｕｎｏｌ，１９９４，１５３（１）：４１２４２０．　１９　Ｃａｒｔｌｏ　Ａ，Ｌｉｓｃｅｒａｉａｔｉ　Ｓ，Ｃａｎａｒｉｓ　ＡＤ，ｃｔ　ａ１．Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｏｆ　ＣＤ４　，ＣＤ８　ｐｒｅｓｓｏｒ　ｅｌｃｌｓ［Ｊ］．Ｈｕｍ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００２，６３（１１）：１０１０—１０１８．　１０　Ｌｉｕ　Ｚ，Ｔｕｇｕｌｅａ　Ｓ，Ｃｏｒｔｅｓｉｎｉ　Ｒ．ｃｔａ１．Ｓｐｅｃｉｉｃ　ｆｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆＴ　ｈｅｌｐｅｒａｌｌｏ—　ＣＤ２８　。ａｎｄ　Ｃ１３８　ＣＤ２８　Ｔ　ｃｅｌｌｓ　ｔｏ　ＣＤ３　Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ　Ｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓ　ｄｕｒ—　ｒｅａｃｔｉｉｖｔｙ　ｂｙ　ｌａｌｏ－ＭＨＣ　ｃｌａｓｓ　Ｉ—ｒｅｓｔｒｉｃｔｄ　ＣＤ８　ｃＤ２８一Ｔ　ｅｃｅｌｓｌＪ］．Ｉｎｔ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９９８，１Ｏ（６）：７７５－７８３．　１１　Ｕ　Ｊ，ＵｕＺ，ＪｉｎｇＳＰ。ｅｔａａ１．Ｔ　Ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ　ＬｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓＩｎｈｉｂｉｔ　ＮＦ—Ｂ—Ｍｅｄ—　ｉｎｇ　ｔｈｅ　Ｎａｔｍａｌ　ｃ∞ｒｓｅ　ｏｆ　ＩＶ－Ｈ１　Ｉｎｆｅｃｔｉｎ［Ｊ］．Ｊｏ　Ｃｌｉｎ　Ｉｎｖｅｓｔ，１９９８，１Ｏ１　（１）：１３７．１４．４．　２０　Ｎｉ￣ｕｅｓ　Ｔ，Ｈｏｍｅｆｆ　Ｇ，Ｋｎｉｐｐ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ—Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　Ｅｘｐ，２／￣ｏｎ　ｏｆ　ｉｔａｄＴｒｅａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ＣＤ８６　Ｇｏｎｅ　ｉｎ　ＡＰＣｌ　Ｊ］．Ｊ　Ｉｍｕｎｏｌ，１９９９，１６３：　６３８６－６３９２．　ＣＤ８　ＣＤ２８一Ｃｅｌｌｓ　ｉｎ　Ｐｅｄｉａｔｉｔｃ｝ⅡＶ　ＩｎｆｅｃｔｉｏｎｌＪ］．Ｐｅｄｉａｔｒ　ｒｅｓ，２０００，４７　（３）：４１８－４２１．　２１　Ｓａｔｏ　Ｋ，ＹａｍａｓＭｔａ　Ｎ，Ｂａｌｍ　Ｍ，ｃｔ　ａ１．Ｍｏｄｉｉｆｄ　Ｉｅｎｙｅｌｏｉｄ　ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ　ｃｅｌｌｓ　ａｃｔ　１２　Ｓ　Ｊｉａｎｇ，Ｓ　Ｔｕｇｕｌｅａ，Ｐｅｎｎｅｓｉ　Ｇ。ｅｔ　ａ１．Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＭＨＣ—ｃｌａｓｓ　Ｉ　ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ　ｈｍｎａｎ　ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ　Ｔ　ｅｌｃｌｓ　ｂｙ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｐｒｉｍｉｎｇ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ［Ｊ］．Ｈｕｍ　ｌｍｍｕｎｏｌ，　１９９８，５９（１１）：６９０－６９９．　１３　Ｃｏｌｏｖａｉ　Ｍ，Ｌｉｕ　Ｚ，Ｃｉｕｂｏ＇ｔａｒｉｕ　Ｒ．ｅｔ　ａ１．Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｘｅｎｏｒｅａｃｔｉｖｅ　ＣＤ４　Ｔ－　ｓａ　ｒｅｇｕｌａｔｏｙｒ　ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ　ｅｌｃｌｓ　ｔｏ　ｉｎｄｕｃｅ　ｎｅ￣ｃａ　ｎｄａ　ｒｅｇｕｌｔａｏｙｒ　Ｔ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．　Ｂｌｏ０［１，２００３，１０１（９）：３５８１．３５８９．　２２　Ｄｈｏｄａｐｋａｒ　ＭＶ，Ｓｔｅｉｎｍａｎ　ＲＭ．Ａｎｔｉｇｅｎ—ｂｅａｒｉｎｇ　ｉｍｍａｔｕｒｅ　ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ　ｃｅｌｓ　ｅｃｌｌ　ａｎｅｒｇｙ　ｂｙ　ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ　ＣＤ８　ｃＤ２８一Ｔ　ｃｅｉｌｓ［Ｊ］．Ｔｒａｎｓｐｌｎｔａａｔｉｏｎ，　２０００，６９（７）：１３０４－１３１０．　１４　Ｉ＿ｅｄｅｎｎａｎ　Ｓ，Ｆｏｃａ　ＮＳ．Ａｎｔｉｇｅｎ　ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎｔｅｇｒａｔｅ　ｏｐｐｏｓｉｎｇ　ｓｉｇｎａｌｓ　ｆｒｏｍ　ＣＤ４　ａｎｄ　ＣＤ８＋ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　Ｔ　ｌｙｌ印ｈ０ｃ　ｅｓ　ｔｏ　ａｒｂｉｔｒａｔｅ　ｔｈｅ　ｏｕｔｃｏｍｅｓ　ｉｎ￣ｃｅ　ｐｅｐｔｉｄｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ＣＤ８（＋）ｒｅｇｕｌａｔｏｙｒ　Ｔ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｉｎ　ｈｕｍａｎｓ　ｌＪ］．Ｂｌｏ０［１，２００２，１ｏｏ（１）：１７４－１７７．　（收稿日期：２００３—０４—０３）　肿瘤的细胞免疫治疗　陈复兴　摘要随着许多抗肿瘤效应细胞在体外的大量培养，使得这些细胞能成功地用于肿瘤治疗。本　文综述以Ｔ淋巴细胞和树突状细胞为基础的肿瘤免疫治疗的基础研究和临床应用现状，以及细胞免　疫治疗中存在的问题。　关键词文章编号肿瘤；Ｔ淋巴细胞；树突状细胞；免疫治疗　１００１—１０３ｘ（２Ｏ０４）一０４—０１９７—０４　中图分类号Ｒ３９２．１１　文献标识码：Ａ　机体免疫系统能够识别和清除肿瘤细胞已被许　要为树突状细胞）治疗肿瘤已取得了较好的临床效　多实验明确证实。一些新技术不断开展如肿瘤基因　果。　表达文库，肿瘤特异性抗原鉴定，用四聚体检测肿瘤　１肿瘤的细胞免疫治疗机理　特异性Ｔ细胞和细胞培养技术的发展等，为肿瘤细　１．１肿瘤抗原　胞免疫治疗提供了新的策略。利用在体外用各种方　肿瘤特异性抗原（ＴＳＡ）是机体识别肿瘤细胞激　为疫苗已成功地诱发人类的特异性Ｔ细胞反应。现　已发现许多肿瘤特异性抗原以及与其结合的ＨＬＡ　分子，它们常以多肽形式与ＭＨＣ　Ｉ或Ⅱ类分子中的　法激活扩增的自身Ｔ淋巴细胞和抗原提呈细胞（主　活免疫系统清除肿瘤的物质基础。以肿瘤抗原肽作　作者单位：２２１００４徐州，解放军第九七医院实验科（主任医师）　审校者：解放军第九七医院李玺　ｌ９８‘　国外医学免疫学分册２００４年第２７携第４期　Ｆｏｒｅｉ￣Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ·Ｓｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｍｍｕｎｏｌｏ￣，Ｊｕｌｙ　２（Ｘ）４，Ｖｄ．２７，Ｎｏ．４　多肽结合域相联结，形成复合物存在于细胞表面。　肿瘤均取得一定疗效　。ＴＩＬ分离培养较为繁杂，成　且需要较多的肿瘤组织，因此，在临床实　实验证实，肿瘤细胞有一个ＨＬＡ一抗原肽复合体被　功率较低，细胞毒Ｔ细胞（ＣＴＬ）识别后即可使其活化增殖并释　际应用中受到一定的限制。在有条件单位，行肿瘤　放淋巴因子，杀伤肿瘤细胞　。现将肿瘤抗原分为６　根治术后，应尽可能进行ＴＩＬ治疗，这是防止肿瘤复　ｅｙ等人报告　类；①表达在免疫豁免区和各类肿瘤细胞上的非突　发的一种有效的治疗方法。最近，Ｄｕｄｌ３例发生转移的黑色素　变抗原；②谱系特异性肿瘤抗原；③肿瘤细胞基因突　用环磷酰胺和氟达拉滨对１变产生的表位；④在骨髓瘤和Ｂ细胞淋巴瘤的免疫　瘤患者进行非清髓性治疗后，用对黑色素瘤具有高　球蛋白基因克隆性重排产生的独特型；⑤肿瘤病毒　反应性ＴＩＬ进行回输治疗，平均回输１ｒＩＬ数为７．８×　产生的表位；⑥非突变的癌胚抗原　Ｊ。　１．２机体对肿瘤的免疫反应　ＣＴＬ是识别与ＭＨＣ分子结合的肿瘤抗原的最　早反应者，也是杀伤肿瘤细胞的关键性效应细胞群，　它主要由ＣＤ８　细胞、ＣＤ４　细胞和ＣＤ８　细胞所组成。肿瘤抗原经抗原提呈细胞加工和提呈　给ＣＴＬ细胞，在辅助因子ＣＤ２８分子的协助下，激活　的ＣＴＩＪ可通过不同途径杀伤肿瘤细胞。抗原提呈细　胞（ＡＰＣ）、Ｔｈ细胞和ＣＴＬ组成的多种细胞免疫调控　网络是产生抗肿瘤免疫应答所必需的。　在肿瘤患者，肿瘤细胞与免疫系统的相互反应　过程中常存在着一种或多种机制上的缺陷，如肿瘤　细胞抗原表达变异，ＭＨＣ—Ｉ类分子不表达或低表　达，缺少共刺激分子和肿瘤细胞分泌免疫抑制因子　诱导Ｔ细胞凋亡。患者抗原提呈细胞（尤其是树突　状细胞）和ＣＴＬ数量减少及功能异常也不能有效识　别和杀伤肿瘤细胞。细胞免疫治疗就是通过回输在　体外经过各种方式培养增殖的大量高质量的自体免　疫效应细胞来增强和激活患者的免疫功能达到清除　体内肿瘤细胞目的。　２肿瘤患者的自身Ｔ细胞治疗　从外周血、肿瘤组织、胸腹水和引流淋巴结等组　织中分离出淋巴细胞，用不同的培养方法制备出以Ｔ　细胞为主的抗肿瘤效应细胞。在较短时间内，培养　出大量的对肿瘤具有杀伤作用，而对自身细胞无损　害的抗肿瘤效应细胞是细胞免疫治疗取得成功的保　证。　２．１　肿瘤浸润性淋巴细胞（Ｔ　）治疗　ＴＩＬ是生长于实体瘤内浸润的淋巴细胞，它们多　为　细胞，也有部份是　细胞。ＴＩＬ中多为　ＣＤ８　Ｔ细胞，少数为ＣＤ４　Ｔ细胞，ＣＴＬ还表达ＣＤ２９／　ＣＤ４５ＲＯ，ＣＤ２５和Ｉ』ＦＡ一１等激活抗原，表明这些细胞　已被活化。从肿瘤中分离出来的ＴＩＬ在体外通过用　ＣＤ３单抗、ＩＬ－２、ＩＬ．４、　ｒＮＦ等激活后通常能够恢复增　殖和杀伤自体肿瘤细胞的功能。临床用激活后的　ＴＩＬ回输治疗肾癌、黑色素瘤、肺癌、卵巢癌和胃癌等　１０　，同时给予大剂量ＩＬ－２。治疗后，１３例患者有６　例为部分反应，４例为混合性反应，可见肺、肝、淋巴　结和腹腔内等部位转移瘤消退，其中１例部分缓解　已达２４个月。检测发现，回输４个月后，ＴＩＬ在体内　仍处于高水平状态。这一结果证明．在非清髓性治　疗后，回输肿瘤反应性淋巴细胞能有效地治疗转移　性肿瘤　］。　２．２　ＣＤ３ＡＫ细胞治疗　ＣＤ３分子是所有成熟Ｔ细胞表面的分化抗原，　由５个亚基组成，与ＴＣＲ组成ＣＤ３／ＴＣＲ复合物。当　ＣＤ３单抗（ＣＤ３ｍＡｂ）与其结合时起模拟抗原作用，导　致ＣＤ３／ＴＣＲ复合物变构，将胞外刺激信号传递至胞　内，通过一系列胞内传导事件使Ｔ细胞活化。活化　后的细胞在一定培养条件下能迅速增殖，这些细胞　是以ＣＤ３　、ＣＤ８　Ｔ细胞和ＣＤ３　、ＣＤ４　Ｔ细胞为主　的异质细胞群，随着培养时间延长，ＣＤ３　、ＣＤ４　Ｔ细　胞数量逐渐减少。ＣＤ３单抗激活的杀伤细胞（Ａｎｔｉ—　ＣＤ３　ａｎｔｉｂｏｄｙ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｃｔｉｖａｔｅｄ　ｋｉｌｌｅｒ，ＣｒｏＡＫ）具有广谱　的杀瘤活性，杀瘤作用主要以颗粒依赖性一粒酶／穿　孔素途径为主。ＣＤ３ＡＫ细胞还能产生一些细胞因子　对机体起免疫调节作用。ＣＤ３ｍＡｂ的液相或固相培　养或培养过程中ＣＤ３ｍＡｂ是否持续加入对培养的细　胞生物特性均有不同的影响。动物实验证实ＣＤ３ＡＫ　细胞对肿瘤有明显的治疗和预防作用。Ｃｕｒｔｉ等于　１９９３年首次报告用自身ＣＤ３ＡＫ细胞和ＩＬ－２治疗２４　例肿瘤患者，结果１例ＰＲ，１例ＭＲ，１６例ＳＤ，６例　ＰＤ，治疗后患者血中淋巴细胞绝对值明显增加。作　者又报告用ＣＤ３ＡＫ细胞治疗３１例晚期肿瘤患者，患　者先服用环磷酰胺，而后单采白细胞并通过阴性选　择富集ＣＤ４　Ｔ细胞，再行ＣＤ３ＡＫ细胞培养，培养后　细胞ＣＤ４　Ｔ细胞为７６％，ＣＤ８　Ｔ细胞为１０％。治疗　结果１例ＣＲ，２例为ＰＲ，８例为ＳＤ。扬文清等报告　用ＣＤ３ＡＫ细胞治疗晚期肿瘤，结果ＰＲ＋ＭＲ为３８．　７％，并能增进患者食欲，减低疼痛，改善睡眠。粱振　强等用ＣＤ３ＡＫ细胞与放疗配合治疗鼻咽癌可明显　减轻急性放射反应，并提高患者免疫功能。Ｃｈａｎｇ等　国外医学免疫学分册２００４年第２７卷第４期　Ｆｏｒｅｉｌｍ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ·Ｓｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｍｍｕｎｏｌｏｋｗ，Ｊｕｌｙ　２００４，Ｖｏ１．２７，Ｎ０．４　－１９９－　用肿瘤细胞疫苗皮下接种，然后手术取出引流淋巴　在治疗结束后，ＣＤ３　、ＣＤ４　和ＣＤ８　Ｔ细胞绝对值均　结，用ＣＤ３单抗激活培养回输，共治疗了１２例晚期　比治疗前增加４５％以上。治疗还能增加患者食欲，　　肾癌，ＣＲ＋ＰＲ＋ＭＲ共有６例，无效６例，。由于淋　改善睡眠和减轻疼痛　Ｊ。４病毒特异性ＣＴＬ治疗　巴结内含大量肿瘤特异性ＣＴＬ，用此法在较短时间　２．某些病毒如ＥＢ病毒，乙肝病毒和人乳头状瘤病　治疗　］。高中度等用ＣＤ３ＡＫ细胞加化疗药物进行　毒等与人类肿瘤有密切的关系。一些病毒基因产物　支气管动脉灌注治疗３２例晚期肺癌，结果有效率为　是重要的肿瘤相关抗原。在未分化的鼻咽癌组织中　　Ｔ　ＣＲ＋ＰＲ　８４．３％，而对照组为４０．０％，作者认为该法　有病毒特性ＣＴＬ，这些病毒特异性ＣＴＬ多为ＣＤ８内可获得大量的抗瘤活性的ＣＤ３ＡＫ细胞以供用于　安全可靠，疗效肯定。Ｔａｋａｙａｍａ等在肝癌切除术后　用自身ＣＤ３ＡＫ回输（细胞数＞３×１０　）治疗，发现治　疗组与对照组相比能明显减低其复发率和延长生存　期　］，黄智芬等人用ＣＤ３ＡＫ细胞加顺铂和５一ＦＵ治疗　癌性胸腹水，治疗有效为８４．４５％，作者认为二者合　用能增强杀瘤作用，促进胸腹水吸收，减少化疗药毒　副作用发生。周岳进等用ＣＤ３ＡＫ细胞加ａ一干扰素　治疗３１例甲胎蛋白（ＡＦＰ）阳性肝癌前期病变患者，　发现治疗能使９５％ＡＦＰ转为阴性，提示对肝癌有较　好的预防作用。国内还有许多作者报告单用ＣＤ３ＡＫ　细胞治疗各种肿瘤，或用ＣＤ３ＡＫ细胞与化疗等治疗　方法联合应用均取得较好的临床效果。实验证明　ＣＤ３ＡＫ细胞静脉回输后可迁移至肝、脾、骨髓血中，　ＣＤ３　ＣＤ８　ＣＴＬ明显增多，治疗２～４周后，肿瘤内出　现以ＣＤ８　Ｔ细胞为主的淋巴细胞广泛浸润。　ＣＤ３ＡＫ细胞由于在体外培养需要细胞因子较少，细　胞易扩增到治疗量，毒副作用少，可作为肿瘤根治术　后防复发一种有效的治疗方法。最近，Ｃｏｈｅｎ等从肿　瘤引流淋巴结中分离出低表达Ｌ．选择蛋白的ＣＤ４　、　ＣＤ８　Ｔ细胞，在体外经ＣＤ３ｍ＿Ａｂ和ＩＬ－２激活培养后　回输给荷瘤小鼠，发现能根除肿瘤和肺转移灶，这是　组很有治疗前途的Ｔ细胞群　。　２．３　ＣＩＫ细胞治疗　ＣＩＫ细胞（Ｃｙｔｏｋｉｎｅ．ｉｎｄｕｃｅｄ　ｋｉｌｌｅｒ　ｃｅｌｌｓ）又称ＮＫ　样Ｔ细胞，是人外周血单个核细胞在体外经ＣＤ３　ｍＡｂ和ＩＦＮ一　等多种细胞因子共培养后获得的异　质细胞群。它的主要效应细胞是ＣＤ３　ＣＤ５６　细胞，　其增殖数量和杀瘤活性均明显高于以往报告的抗肿　瘤效应细胞，ＣＩＫ对肿瘤细胞杀伤不受ＭＨＣ限制，其　杀瘤细胞的机理主要是通过颗粒依赖性途径杀伤靶　细胞。ＣＩＫ还表达Ｆａｓ配体，从而促进肿瘤细胞捌　亡。杜清友等用ＣＩＫ对接种肝癌细胞的裸鼠进行治　疗，发现ＣＩＫ抑瘤率可达８４．７％，而末梢血单个核细　胞（ＰＢＭＣ）和ＬＡＫ细胞则分别为３７．１％和５２．８％。　我们用ＣＩＫ治疗６３例晚期肿瘤，有效率为４４．４６％，　治疗能减低肿瘤标志物如ＡＦＰ和癌胚抗原（ＣＥＡ），　细胞，也有ＣＤ４　Ｔ细胞，这些细胞与四聚体试剂结　合经流式细胞仪分拣后，在病毒抗原肽存在情况下　可迅速扩增到治疗量，此类细胞有记忆表型和Ｔｃｌ　细胞因子谱。用病毒转化的Ｂ细胞和病毒抗原荷载　的树突状细胞在体外能诱导培养出病毒特异性　ＣＴＬ。Ｒｏｓｋｒｏｗ等报告，乳头状瘤病毒Ｅ６和Ｅ７　ＲＮＡ　转染的ＤＣ与ＰＢＭＣ共培养后，发现被刺激的ＣＴＬ能　有效地溶解人官颈癌细胞。用霍奇金氏病患者自身　ＥＢ病毒一特异性ＣＴＬ回输治疗，发现这些细胞在体　内生存期可超过３周，并保持有效的抗病毒活性，在　转移灶中可检测出此类细胞，患者血中病毒量下降，　症状得到改善¨　。由于病毒相关的一些肿瘤细胞免　疫原性较差，因此病毒特异性ＣＴＬ治疗相关肿瘤值　得进一步研究应用。　２、５＂／８１＂细胞治疗　７ｆｆＩ＇ＣＲ　Ｔ细胞约占外周血中Ｔ细胞的５％～　１５％，７８１＂细胞与　细胞不同，它是以ＭＨＣ非限制　方式识别各类抗原。用７ｆｆＩ＇ＣＲ链单抗或磷酸脂配体　可以在体外激活扩增＂／８１＂细胞，其纯度可达８５％以　上，激活的＂／８１＂细胞在体外对多种肿瘤细胞株有细　胞毒性作用。许凯黎等用扩增的＂／８１＂细胞和人肠癌　细胞混合接种裸鼠皮下，一个月后，发现７８１＂细胞能　有效抑制癌细胞在裸鼠体内的生长　朱忆期等人用　７ｏ￣１７细胞／ＩＬ．２治疗了４例青年胃印戒细胞癌患者，　治疗后外周血中ＣＤ３　、ＣＤ４　Ｔ细胞比治疗前增加，　随访１０～２５个月未见转移和复发。由于７８１＂细胞分　布和生物学特点，＂／８１＂细胞可能会在上皮细胞肿瘤的　治疗中起重要作用。　２．６共激活Ｔ细胞治疗　研究证明，仅肿瘤抗原递呈与ＴＣＲ识别，不足以　介导免疫应答，尚需共刺激分子与Ｔ细胞上相应的　分子结合后产生共刺激信号，才能使肿瘤特异性　ＣＴＬ产生有效的抗肿瘤免疫应答。利用ＣＤ２８单抗　可模拟ＣＤ２８配体，有效地为Ｔ细胞活化提供第二信　号，再以ＣＤ３单抗激活ＴＣＲ信号途径，这样在体外　可扩增出高效的抗肿瘤ＣＴＬ细胞。Ｌｕｍ等人将其称　２００·　国外医学免疫学分册２Ｏ０４年第２７卷第４期　Ｆｏｒｅｉｇｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ·Ｓｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｉｍｍｕｎｏｌ　为共激活Ｔ细胞（ＡｎｔｉＣＤ３／ａｎｔｉ—ＣＤ２８　ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉ—　３．１．２肿瘤细胞与ＤＣ融合杂交细胞疫苗：Ｈｏｌｍｅｒｓ　ｂｏｄｙ－ｃｏａｃｔｉｖａｔｅｄ　Ｔ　ｃｅｌｌｓ，ＣｏＡＣＴｓ）　。ＣｏＡＣＴｓ增殖能　等报告用ＤＣ和恶性黑色素细胞融合，这种融合细胞　力强于ＣＤ３ＡＫ细胞并能稳定产生ＩＦＮ一７、ＴＮＦＱ和　他们称之为速成树突瘤（Ｉｎｓｔａｎｔ　ｄｅｎｄｒｉｔｏｍａｓ），它能表　ＧＭ－ＣＳＦ等细胞因子，其表型ＣＩＭ　Ｔ细胞大约为　达抗原提呈的关键分子：ＨＬＡ—Ａ、Ｂ、Ｃ及ＨＩ　—ＤＲ、　５７．５％，ＣＤ８　Ｔ细胞约为４２．５％，体外实验证明对许　ＣＤ８０和ＣＤ８６。在体外，它能有效激活自身ＣＤ８　多肿瘤细胞有杀伤活性。Ｉｔｏ和Ｓｔｍｎｅ等用鼠肿瘤引　ＣＴＬ，使其增殖并分泌ＩＦＮ一７，激活的ＣＴＬ能溶解自身　流淋巴结培养的ＣｏＡＣ％，回输治疗缺乏ＭＨＣ工类分　原代肿瘤细胞　。动物实验证实，肿瘤细胞与ＤＣ　子的黑色素瘤Ａ９Ｐ细胞株接种鼠造成播散性转移，　融合的细胞可诱导产生肿瘤特异性ＣＴＬ，并能保护　结果６０％小鼠被治愈，并能使已建立的ＭＣＡ２０５肺　转移数明显减少　１　。Ｌ舡ｍ等给９例晚期癌症患者回　输了ＣｏＡＣＴｓ工期试治，回输细胞数在１７．６～４２．９×　ｌ０９，发现治疗能增强患者新鲜分离的ＰＢＭＣ分泌　ＩＦＮ一７和ＴＮＦａ　。　３以树突状细胞（ＤＣ）为基础的细胞免疫治疗　抗原提呈是诱导细胞免疫反应的一个关键性调　控步骤。鉴于ＤＣ的独特功能和ＤＣ培养技术的日臻　成熟，使以ＤＣ为基础的细胞免疫治疗方法日益增多。　这些方法主要是以ＤＣ强劲的加工、提呈抗原功能、表　达淋巴细胞共刺激分子、启始初始型Ｔ细胞、刺激记　忆Ｔ细胞和抗原特异性ＣＴＬ反应的机理而设计。　３．１　ＤＣ肿瘤疫苗治疗　３．１．１肿瘤抗原体外致敏的ＤＣ肿瘤疫苗：这种ＤＣ　肿瘤疫苗既可荷载单一或多种肿瘤抗原，又可荷载　整个肿瘤细胞抗原（肿瘤细胞裂解物和肿瘤细胞酸　洗脱物等）。动物实验证明，应用肿瘤抗原肽致敏的　ＤＣ能有效地治疗和预防肿瘤发生。在人类，用抗独　特型抗体荷载ＤＣ后回输治疗Ｂ细胞淋巴瘤，发现４　例中有３例瘤体完全消失，且无副作用。用前列腺　特异性抗原（ＰＡＳ）和用前列腺酸性磷酸酶联结的ＧＭ　ＣＳＦ在体外致敏ＤＣ，回输治疗对激素疗法无效的　前列腺癌，发现用前法者可使患者ＰＳＡ含量下降，多　数患者病情得到缓解，而用后法治疗３ｌ例患者均对　上述融合蛋白产生免疫反应，有６例患者ＰＳＡ含量　下降，用肿瘤抗原肽致敏的ＤＣ治疗的肿瘤还有黑色　素瘤，多发性骨髓瘤等均取得一定的临床效果。而　１ｗａｓｈｉｔａ和Ｈｅｍａｎｄｏ等人分别用自身肿瘤细胞溶胞　物致敏ＤＣ治疗９例晚期妇科肿瘤和无法切除的胆　管细胞癌，结果前者有３例患者病情稳定，有６例对　肿瘤溶胞物产生特异性迟发性超敏反应，后者治疗　后６例病情稳定，１例混合反应，３例无效“　。Ｙｕ等　用自体神经胶质瘤细胞酸洗脱液致敏的ＤＣ细胞接　种患者，７例中有４例诱导出特异性ＣＴＬ反应¨　。　应用多种其它的肿瘤抗原肽致敏ＤＣ治疗乳腺癌、肾　细胞癌、慢粒和卵巢癌等也取得一定的疗效。　小鼠免受相应的肿瘤细胞攻击和限制已发生的肿瘤　扩散。Ｋｕ出ｒ等用融合疫苗治疗了ｌ７例进展期肾　癌，结果４例为ＣＲ，其中的３例仅在２次注射后所有　转移灶消失，２例ＰＲ　１　。Ｋｉｋｒｃｈｉ等人用神经胶质瘤　和ＤＣ融合细胞治疗了９例放、化疗无效的神经胶质　瘤患者，治疗８周后２例为ＰＲ，４例为ＳＤ，３例为　ＰＤ“　。在美国第ｌ６届生物治疗协会年会上，有数篇　报告应用本法治疗肿瘤均取得一定的疗效。　３．２　ＤＣ诱导抗原特异性ＣＴＬ治疗　在体外，荷载抗原的ＤＣ与ＣＴＬ细胞共培养后能　产生肿瘤抗原特异性细胞毒细胞。Ｍａｒｔｅｎ等人报告　用自身荷载ＣＥＡ的ＤＣ与自身ＣＩＫ共培养７天后发　现，ＣＩＫ能特异性溶解表达ＣＥＡ的肿瘤细胞，且与抗　原肽特异性Ｔ细胞数量增加相关　１引。荷载抗原的　ＤＣ还能促进ＣＴＬ增殖。这些研究为ＤＣ诱导的肿瘤　特异性ＣＴＬ的临床治疗提供了依据。我们用慢性粒　细胞性白血病患者ＤＣ与自身ＣＩＫ共培养，发现能明　显增强ｃⅡ（杀伤自身白血病细胞活性¨　。　４肿瘤的细胞免疫存在的问题及展望　４．１肿瘤的细胞免疫治疗的副作用　在黑色素瘤细胞免疫治疗中有２０％患者可发生　白癜风，这在ＤＣ肿瘤疫苗治疗时多见，可能是治疗　时诱发的自身免疫性疾病。其它一些报告有发热，　恶心和对小牛血清过敏反应等，有些反应随着对细　胞因子纯化方法和细胞培养方法的改善等可减少其　发生。　４．２细胞免疫治疗疗效差的原因　４．２．１细胞方面的原因：回输细胞数量较少，难以　杀伤大量的肿瘤细胞；培养的细胞接近或达到衰老　状态，或某些辅助分子如ＣＤ２８表达缺陷：也可因化　疗或患者体内抗肿瘤效应细胞数、质量的改变，使得　在体外难以培养出大量的抗肿瘤效应细胞；回输的　细胞不能进入肿瘤或淋巴结内等。　４．２．２宿主方面的原因：肿瘤细胞太多，超过了回　输细胞的杀伤能力；化疗和放疗损伤体内基质和淋　巴结，导致回输细胞生存条件的破坏；缺少ＣＩＭ　Ｔ　圄　医堂免疫学分册２００４年第２７卷第４期　Ｆｏｒｅｉｇｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ·Ｓｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｊｕｌｙ　２００４，Ｖｏ１．２７，Ｎ０．４　·２０１·　细胞辅助；宿主调控性细胞杀伤或灭活回输的细胞　和肿瘤细胞杀伤或灭活回输细胞；由于肿瘤抗原表　达缺乏和回输细胞不能识别肿瘤细胞；肿瘤共刺激　分子缺乏诱导回输细胞无能或凋亡等。　４．３肿瘤的细胞免疫治疗要规范化　ｃｏｍｐｌｅｘ　ｏｎ　ａ　ｔａｒｇｅｔ　ｃｅｌｌ　ｃａｎ　ｌｉｃｉｔ　Ａ　ｃｙｔｏｌｙｔｉｃ　Ｔ　ｃｅｌｌ　ｐｏｎｓｅ［Ｊ］，ｌｍｒｍｍｉ—　ｔｙ，１９９６，４：５６５—５７１．　２　Ｒｉｂａｓ　Ａ，Ｂｕｔｔｅｒｆｉｅｌｄ　ＬＨ，Ｇｌａｓｐｙ　Ｊ　Ａ．Ｃｕｒｒｅｎｔ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓｉｎ　ｐ￣ｌｌｅｒｃ　ｖａｃ—　ｃｉｎｅｓ　ａｎｄ　ｃｅｌｌｕｌａｒ　ｉｍｍｕｎｏｈｔｅｒａｐｙ［Ｊ］．Ｊ　Ｃｌｉｎｉｃ　Ｏｎｃｏｌ，２００３，２１（１２）：２４１５．　２４３２．　３　Ｙａｎｎｅｌｌｉ　ＪＲ，Ｈｙａｔｔ　Ｃ，Ｍｃｃｏｎｎｅｌｌ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ－ｉｉｌｆｎｔｒａｔｉｎｇ　ｌｙｍ—　已用于动物实验和临床试治的抗肿瘤效应细胞　种类较多。细胞培养方法、时间和细胞因子加入量和　加入时间对细胞数、质量均有影响。不同细胞的输　ｐｈｏｃ￣ｅｓ　ｉｆ￣０ｍ　ｈｕｍａｎ　ｓｏｌｉｄ　ｃａｎｃｅｒｓ：ｓｕｍｍａｒｙ　ｏｆ　Ａ　５一ｙｅａｒ　ｅｘｐｅｒｉｎｃｅ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｃａｎｃｅｒ，１９９６，６５：４１３－４２１．　４　Ｄｕｄｌｅｙ　ＭＥ，Ｗｕｎｄｅｒｌｉｃｈ　ＪＲ，Ｒｏｂｂｉｎｓ　ＰＦ，ｅｔ　ａ１．Ｃａｎｃｅｒ　ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ａｕｔｏ—　注途径，输入细胞的数、质量，治疗过程中与其联合　应用的生物反应调节剂的种类、剂量，与其它疗法的　联合应用等均影响疗效。此外，疾病种类、分期也影　响疗效。因此，在设计治疗方案和疗效判定方面尽　可能规范化，以利积累更多的治疗经验，得以推广应　用。除已有的疗效判断标准外，还应建立行之有效　的免疫监ｉ贝０指标来评定疗效，如用四聚体和ＥＬＩＳＰＯＴ　等技术来精确地评定肿瘤特异性ＣＴＬ的数、质量变　化　。　４．４肿瘤免疫治疗的其它限制因素　由于细胞免疫治疗是在体外培养自身的抗肿瘤　效应细胞，因此整个疗程时间较长，培养方法较复　杂，要求严格，整个治疗费用较高，这些因素限制该　法推广应用。　４．５展望　随着肿瘤分子生物学和肿瘤免疫学的发展，已　能在体外培养出许多种类不同的特异性和非特异性　的抗肿瘤效应细胞，尤其是肿瘤抗原的鉴定和合成、　四聚体检测及分拣以及ＤＣ细胞的培养，使得能在体　外成功地培养出大量的肿瘤特异性ＣＴＬ细胞，真正　开始了主动免疫和过继性免疫相结合的肿瘤特异性　免疫治疗。一些新的肿瘤分子生物学技术和免疫监　测指标的建立，使人们能较精确地评价肿瘤患者的　肿瘤分子和细胞免疫功能的数、质量变化，并能针对　每个病人的实际情况，设计个体化细胞免疫治疗方　案，如肿瘤不表达或低表达ＭＨＣ时用ＣＩＫ或７ＦＦ治　疗，病毒相关肿瘤用病毒特异性ＣＴＬ治疗，Ｔ细胞低　表达ＣＤ２８时用ＣｏＡＣＴｓ治疗等，也可用不同种类和　数量的细胞协同治疗等，并可依据治疗后的机体肿　瘤免疫反应来不断调整治疗方案。　随着对肿瘤免疫逃逸机制的不断了解，细胞免　疫治疗将与传统的肿瘤治疗（手术，化、放疗）和新的　治疗方法如基因治疗、抗血管生成治疗等相联合，使　其在肿瘤治疗中发挥重要的作用。　参考文献　１　Ｓｙｋｕｌｅｖ　Ｙ．Ｊｏｏ　Ｍ，Ｖｔｕｒｉｎａ　Ｉ，ｅｔ　ａ１．Ｅｖｉｄｅｎｃｅ　ｔｈａｔ　ａ　ｓｉｎｇｌｅ　ｐｅｐｔｉｄｅ－ＭＨＣ　ｉｍｍｕｎｉｔｙ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ａｆｔｅｒ　ｃｌｏｎａｌ　ｍｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　ｌＪＪ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００２，２９８：８５０－８５４．　５　Ｃｕｒｔｉ　ＢＤ，Ｌｏｎｔｏ　ＤＬ，Ｏｃｈｏａ　ＡＣ，ｅｔ　ａ１．Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｃａｎｃｅｒ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｅｘ　ｖｉｖｏ　ａｎｔｉ—ＣＤ３一ａｃｉｔｖａｔｅｄ　ｋｉｌｌｅｒ　ｃｅｌｌｓ　ａｎｄ　ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ一２［Ｊ］．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｏｎｃｏｌ，　１９９３，１１２（４）：６５２－６５９．　６　Ｃｈａｎｇ　ＡＥ，Ａｒｕｇａ　Ａ，Ｃａｎｅｒｏｎ　ＭＪ，ｅｔ　ａ１．Ａｄｏｐｔｉｖｅ　ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ　ｗｉｔｈ　ｖａｅ—　ｃｉｎｅ－ｐｒｉｍｅｄ　ｌｙｍｐｈ　ｎｏｄｅ　ｃｅｌｌｓ　ｓｅｃｏｎｄａｒｉｌｙ　ａｃｔｉｖａｔｄｅ　ｗｉｔｈ　ａｎｔｉ—ＣＤ３　ａｎｄ　ｉｎ—　ｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２［Ｊ　Ｊ．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｏｎｃｏｌ，１９９７，１５：７９６—８０７．　７　Ｔａｋａｙａｍａ　Ｔ，Ｓｅｋｉｎｅ　Ｔ，Ｍａｋｕｕｃｈｉ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ａｄｏｐｔｉｖｅ　ｉｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ　ｔｏ　ｌｏｗ—　ｅｒ　ｐｏｓｔｓｍ＇ｇｉｃａｌ　ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｌｕａｒ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ａ　ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ　ｒｔｉｌａ［Ｊ　Ｊ．Ｉ￣９．ｎｃｅｔ，２Ｏ０Ｏ，３５６：８０２—８０７．　８　Ｃｏｈｅｎ　ＰＡ，Ｐｅｎｇ　Ｌ，Ｋｊａｅｒｇａａｒｄ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｔ－ｃｅｌｌ　ａｄｏｐｔｉｖｅ　ｔｈｅｒａｐｙ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒｓ：　Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｆｏ　ｉｍｐｒｏｖｄｅ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ［Ｊ］．Ｃｒｉｔ　Ｒｅｗ　ｌｍｕｎｏｌ，　２００１，２１：２１５－２４８．　９陈复兴，刘军权，张南征，等．自身细胞因子诱导的杀伤细胞过继　性免疫治疗恶性肿瘤的临床观察［Ｊ］．癌症，２００２，２７（７）：１９７．８０１．　１０　Ｒｏｓｋｒｏｗ　ＢＭＡ，Ｓｕｚｕｋｉ　Ｎ，Ｇａｎ　ＹＪ，ｅｔ　ａ１．Ｅｐｓｔｅｉｎ—Ｂａｒｒ　ｖｉｏｒｓ－ｓｐｅｅｉｉｆｃ　ｃｙｔｏ—　ｔｏｘｉｃ　Ｔ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　ｆｏｌ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ＦＢＶ—ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｒｏ—　ｌａｐｓｄｅ　Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ　ｄｉｅｓａｓｅ［Ｊ］．Ｂｌｏｏｄ，１９９８，９１（８）：２９２５—２９３４．　１１　Ｌｕｒｅ　ＬＧ，Ｌｅｆｅｖｅｒ　ＡＶ，Ｔｒｅｉｓｍａｎ　ＪＳ，ｅｔ　ａ１．Ｉｍｍｕｎｅ　ｍｏｄｕｌａｆｉｏｎ　ｉｎ　Ｃ￣ＲＩｌｃｅｒ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ａｆｔｅｒ　ａｄｏｐｔｉｖｅ　ｔｒａｎｓｆｅｒ　ｏｆ　ｎａｔｉ－·ＣＤ３／ａｎｔｉ－·ＣＤ２８－·ｃｏａｃｔｉｖａｔｄｅ　Ｔ　ｅｃｌｌｓ－·　ｐｈａｓｅ　Ｉ　ｃｌｉｉｎｃａｌ　ｔ￣ａｌ［Ｊ］．Ｊ　Ｉｍｕｎｏｔｈｅｒ，２００１，２４（５）：４０８－４１９．　１２　Ｉ【０　Ｆ，Ｃａｗ　Ａ，Ｓｖｅｎｓｓｓｏｎ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ａｎｆｉｔｕｍｏｒ　ｒｅａｃｔｉｖｉｙｔ　ｏｆ　ａｎｔｉ—ＣＤ３／ａｎｔｉ—　ＣＤ２８　ｂｅａｄ—ａｃｔｉｖａｔｄｅ　ｌｍｙｐｈｏｉｄ　ｃｅｌｌｓ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ｃｅｌｌ　ｔｈｅｒａｐｙ　ｉｎ　ａ　ｍｕｆｉｎｅ　ｍｏｄｅｌ［Ｊ］．Ｊ　ｌｍｍｕｎｏｔｈｅｒ，２００３，２６（３）：２２２—２３３．　１３　１ｗａｓｈｉｔａ　Ｙ，Ｔａｈａｒａ　Ｋ，Ｇｏｔｏ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ　Ａ　ｐｈａｓｅ　Ｉ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ａｕｔｏｌｏｇｕｓ　ｄｅｎ—　ｄｒｉｔｉｃ　ｃｅｌｌ—ｂａｓｅｄ　ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ　ｆｏｒ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｕｎｒｅｓｅｃｔａｂｌｅ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｌｉｖｅｒ　ｃｎａｃｅｒ［Ｊ　Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ　ｌｍｍｕｎｏｌ　ｌｍｕｎｏｈｔｅｒ，２００３，５２：１５５—１６１．　１４　Ｙｕ　ＪＳ，Ｗｈｅｅｌｅｒ　ＣＪ，Ｚｅｌｙｔｅｒ　ＰＭ，ｅｔ　ａ１．Ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆｍａｌｉｇｎａｎｔ　ｇａｌｉｏｍａ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｐｅｐｔｉｄｅ—ｐｕｌｓｅｄ　ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ　ｃｅｌｓ　ｅｌｉｃｉｓｔ　ｓｙｓｔｅｍ　ｃ￣ｏｔｏｘｉｙｔ　ｎａｄ　Ｔ－　ｃｅｌｌ　ｉｎｆｉｌｒｔａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２００１，６１（３）：８４２—８４７．　１５　ＨｏｌｍｅｒｓＩＪＶＩ，Ｌｉ　ＪＨ，Ｓｔｉｃｃａ　ＲＰ，ｅｔ　ａ１．Ａ　ｐａｄｉｄ，ｎｏｖｅｌ　ｓｔｒａｔｅｇｙｔｏｉｎｄｕｃｅｔｕ—　ｎｏｒ　ｃｅｌｌ－·ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｃｙｔｏｔｏ：ｄｃ　Ｔ　ｌｍｙｐｈｏｃｙｔｅ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　ｕｓｉｎｇ　ｉｎｓｔａｎｔ　ｄｅｎｄｒｉｔｏ－·　ｍａｓ［Ｊ］．Ｊ　ｌｍｕｎｏｔｈｅｒ，２００１，２４（２）：１２２—１２９．　１６　ＫｕｇｌｅｒＡ，ＳｔｕｈｌｏｅｒＧ，Ｗａｌｄｅｎ　Ｐ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆｈｕｍａｎｍｅｔａｓｔａｔｉｃｒｏ—　ｎａｌ　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ａｆｔｅｒ　ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｔｕｍｏｒ　ｃｅｌｌ—ｄｅｎｄｒｉｉｔｃ　ｃｅｌｌ　ｈｙｂｒｉｃｓ　【ＪＪ．Ｎａｔ　Ｍｅｄ，２Ｏ０Ｏ，６：３３２—３３６．　１７　Ｋｉｋｕｃｈｉ　Ｔ，Ａｋａｓａｋｉ　Ｙ，ｌｒｉｅ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ａ　ｐｈａｓｅ　ｌ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｔｒｉａｌ　ｏｆ　ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇｌｉｏｍａ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｔ｝Ｉ　ｆｕｓｉｏｎｓ　ｏｆ　ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ　ａｎｄ　ｇｌｉｏｍａ　ｃｅｌｌｓ　［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ　ｈｎｍｕｎｏｌ　Ｉｍｕｎｏｈｔｅｒ，２００１，５０：３３７—３４４．　１８　Ｍａｒｔｅｎ　Ａ，Ｇｌｔｅｎ　Ｔ，Ｚｉｓｋｅ　Ｃ，ｅｔ　ａｉ．Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｃｔｉｖａｔｄｅ　ａｎｄ　ａｎｔｉｇｅｎ—　ｓｐｅｃｉｉｆｃ　ｒｒ　ｃｅｌｌｓｗｉｔｈ　ｃｙｔｏｔｃ０ｄｃａｃｔｉｖｉｔｙａｆ＇ｔｅｒ　ｃｏ－ｃｕｌｕｔｒｏｗｉｔｈ　ｄｅｎｄｒｉｉｔｃｃｅｌｌｓ　【Ｊ　Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ　ｌｍｕｎｏｌ　ｌｍｕｎｏｔｈｅｒ，２００２，５１：２５－３２．　２０２·　国外医学免疫学分册２００４年第２７　第４期　Ｆｏｒｅｉｇｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ＂Ｓｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｖａｃｃｉｎｅ　ｔｈｅｒａｐｙ：ｒｅｓｕｔｔｓ　ｏｆ　ａ　ｗｏｒｋｓｈｏｐ　ｓｐｏｎｓｏｒｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｓｏｃｉｅｔｙ　ｆｏｒ　ｂｉｏｌｏ百‘　ｌ９刘军权，陈复兴，主鸿鹄，等．慢性粒细胞白血病患者ｊ）ｃ对细胞　因子诱导的杀伤细胞细胞毒作用的影响［Ｊ］．细胞与分子免疫学　杂志，２Ｏ０２，１８（３）：２７４．２８０．　２０　Ｋｅｉｔｈｏｌｇ　Ｕ，ｗｅｂｅｒ　Ｊ，Ｆｉｎｋｅ　ＪＨ，ｅｔ　ａ１．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃ　ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ　ｏｆ　Ｃ￣ｑｃｅｒ　ｃａｌ　ｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］．Ｊ　ｌｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ，２００２，２５（２）：９７　１３８．　（收稿日期：２００３—０１—１６）　ＢＲＣＡ１与ＤＮＡ损伤修复及转录调节　王涛　摘要ＢＲＣＡ１基因定位于人染色体１７ｑ１２—２１，编码蛋白含有１８６３个氨基酸残基。ＢＲＣＡ１蛋白具　有许多与其他蛋白相互作用的位点，通过蛋白之间的相互作用来发挥其重要的生物学功能，包括细胞　周期调控，ＤＮＡ损伤修复，基因的转录调节，细胞凋亡和泛素化等。ＢＲＣＡ１基因的突变与家族性乳腺　癌及卵巢癌的发生密切相关，对ＢＲＣＡ１分子功能尤其是ＤＮＡ损伤修复和转录调节的研究，将有利于　阐明肿瘤发生的机理。因此本文就ＢＲＣＡ１的结构及其在ＤＮＡ损伤修复和转录调节方面的研究进展　做一综述。　关键词文章编号ＢＲＣＡ１；ＤＮＡ损伤修复；转录调节　１００１—１０３Ｘ（２００４）一０４—０２０２—０９　中图分类号Ｒ３９２．２　文献标识码：Ａ　乳腺癌是危害妇女健康和生命的主要恶性肿　１８６３个氨基酸残基的蛋白质，分子量约２２０ＫＤ　。　瘤，流行病学资料显示，在女性恶性肿瘤中，乳腺癌　ＢＲＣＡ１的外显子１１较大，编码６１％的蛋白质。　的发生率和死亡率高居首位。在我国，乳腺癌的发　１．２　ＢＲＣＡ１蛋白的特征性结构域及相互作用的蛋　病率也在逐年上升。随着乳腺癌的发病率的不断增　白　加，对乳腺癌相关基因的研究已成为该领域的热点。　通过序列分析发现，ＢＲＣＡ１蛋白Ｎ一端含有一个　ＢＲＣＡ１（ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｇｅｎｅ　１）基因定位于　环指结构域，具有典型的ｃｙｓ３．ｈｉｓ—ｃｙｓ４的锌指结　人染色体１７ｑ１２．２１，ＢＲＣＡ１的基因的突变与家族性　构　］，这是转录调节蛋白的特征性结构域。ＢＲＣＡ１　乳腺癌及卵巢癌的发生密切相关，４０％～４５％的遗　环指结构域的功能没有完全阐明，但通过酵母双杂　传性乳腺癌与ＢＲＣＡ１基因突变有关，而在乳腺癌和　交筛选发现另一个具有环指结构域的蛋白ＢＡＲＤ１　卵巢癌都高发的家族中，８０％的患者ＢＲＣＡ１基因发　（ＢＲＣＡ１．ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｒｉｎｇ　ｄｏｍａｉｎ　ｐｒｏｔｅｉｎ），ＢＡＲＤ１能与　生突变　Ｊ。Ｍｉｋｉ等在１９９４年通过定向克隆的方法获　ＢＲＣＡ１的环指结构域相互作用。ＢＡＲＤ１的主要功能　得ＢＲＣＡ１的完整ｃＤＮＡ　Ｊ。在过去的十年中，许多学　有①ＢＡＲＤ１与聚腺苷酸化因子ＣｓｔＦＳ０相互作用，抑　者致力于ＢＲＣＡ１的结构和功能的研究，发现ＢＲＣＡ１　制其活性，参与在转录和ＤＮＡ损伤修复过程中ＲＮＡ　可以同许多重要的蛋白结合，通过蛋白之间的相互　加工的调控；②ＢＡＲＤ１和ＢＲＣＡ１均具有泛素蛋白连　作用，参与细胞周期调控，ＤＮＡ损伤修复，基因的转　接酶的活性，且两者有协同作用；③促进ＢＲＣＡ１核　录调节，细胞凋亡，泛素化等重要的细胞活动。其中　输入，通过覆盖ＢＲＣＡ１核输出信号阻止其输出；④　以ＤＮＡ损伤修复和转录调节最为重要，对于这些功　维持基因组的稳定性，为正常胚胎的发育所必　４］　能的深入研究，将有利于阐明ＢＲＣＡ１的肿瘤抑制功　垂　３，能及机理。　ＢＲＣＡ１的第１１外显子是最大的外显子，编码约　ｒｆ玎　Ｏ　１　ＢＲＣＡ１基因的结构和表达产物　１，１　ＢＲＣＡ１基因的定位及基因组结构　６０％的蛋白质，含有两个核定位信号ＮＬＳ１（氨基酸　５０１　ＫＣＫＲＫＲＲＳ０７）和ＮＩＳ２（６０７ＫＫＮＲＬＲＲＫ　６１４），借　ＢＲＣＡ１基因定位于人染色体１７ｑ１２．２１，基因组　助核定位信号ＢＲＣＡ１被引导进入细胞核，从而发挥　ＤＮＡ长约ｌＯＯｋｂ，包含２４个外显子（２２个编码，２个　其ＤＮＡ损伤修复、转录调节等重要的生物学功能　５．。　非编码），其中２２个转录为７．８ｋｂ的ｍＲＮＡ，编码含　作者单位：３１００３１杭州，浙江大学免疫学研究所（硕士研究生）　审校者：笫二军医大学免疫学研究所曹雪涛　此外，细胞内的多种蛋白如ＲＡＤ５０、ＲＡＤ５１、ｐ５３、ＲＢ　和ｃ．Ｍｖｃ等能直接或问接地与ＢＲＣＡ１结合，这些结　果表明１　１外显子对ＢＲＣＡ１蛋白功能的重要性　。