血液葡萄糖定量测定

目的

了解测定原理，掌握福林-吴宪氏法测定葡萄糖方法。 原理

葡萄糖是多羟基的醛类化合物，其醛基具有还原性，与碱性铜试剂反应后葡萄糖的醛基被氧化成羧基，铜(Cu2+)离子被还原成砖红色的氧化亚铜（Cu2O）。氧化亚铜可使磷钼酸还原成钼蓝其蓝色的深浅葡萄糖浓度成正比，在620nm处有最大吸收峰。用标准葡萄糖利用分光光度计一同进行比色测定，可计算出样品中葡萄糖的含量。

测定血糖是在特制福林一吴宪血糖管中进行，该血糖管于4m1容量处，管颈缩小成一细管状，

可以减少在煮沸时管内液体与空气的接触，避免产生的氧化亚铜再氧化。 步骤

1. 用钨酸法制备1：10全血无蛋白滤液(相当于将原血稀释了10倍，已由教师准备好)。 2、取4支血糖管按表操作 血糖管 空白管 低浓度标准管 高浓度标准管 测定管 试剂 无蛋白血滤液（ml） — — — 1.0 蒸馏水（ml） 2.0 1.0 — 1.0 标准葡萄糖应用液（ml） — 1.0 2.0 — 碱性铜试剂（ml） 2.0 2.0 2.0 2.0 混匀，置沸水浴中煮8分钟，取出用流动的自来水冷却3分钟（切勿摇动血糖管） 磷钼酸试剂（ml） 2.0 2.0 2.0 2.0 混匀放置2分钟,使CO2溢出. 1：4磷钼酸溶液加至 25 25 25 25 OD620 盖紧紧管口颠倒摇匀，在420nm波长处进行比色测定，用空白管调零读取各管的光密度值（OD）或光吸收值（A）。 3. 计算 高浓度标准管：

OD测 ×0.2×100/0.1 = 葡萄塘mg/100ml OD高标 OD测

低浓度标准管： OD低标

×0.1×100/0.1 = 葡萄塘mg/100ml