乳铁蛋白的开发利用及其研究进展

维普资讯 http://www.cqvip.com 垦ｌ飘晶　垒ＣＨＩＮＡ　ＤＡｌＲＹ　ｌＮＤＵＳＴＲＹ　乳铁蛋臼的开发　Ｉｊ用及其研究进展　凌雪萍　，庞广昌　，邢伟　（１．天津商学院生物工程系，天津３００１３４；２．黑龙江乳业集团，黑龙江哈尔滨１５００８６）　摘要：综述了乳铁蛋白的基本性质、功能特性及其一些最新的研究进展，并对牛初乳中乳铁蛋白的开发利用进行了　展望　关键词：乳铁蛋白；功能特性；研究进展；开发利用　中图分类号：ＴＳ２５２．１　文献标识码：Ａ　文章编号：１００１—２２３０（２００２）０４—００１８—０４　Ｒｅｃｅｎｔ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｏｆ　ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ　ＬＩＮＧ　Ｘｕｅ—ｐｉｎｇ　，ＰＡＮＧ　Ｇｕａｎｇ—ｃｈａｎｇ　，ＸＩＮＧ　Ｗｅｉ　（Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，Ｔｉａｎｊｉｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｏｍｍｅｒｃｅ，Ｔｉａｎｊｉｎ　３００　１　３４，Ｃｈｉｎａ；　２．Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ　Ｄａｉｒｙ　Ｉｎｄｕｓｔｒｙ　Ｇｒｏｕｐ，Ｈａｒｂｉｎ　１　５００８６，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｂａｓｉｃ　ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ａｎｄ　ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ　ａｎｄ　ｓｏｍｅ　ｒｅｃｅｎｔ　ｒｅｓｅａｒｃｈｅｓ　ｏｆ　ｉｔ　ｗｅｒｅ　ｒｅｖｉｅｗｅｄ　ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ．Ｉｎ　ａｄｄｉ’　ｔｉｏｎ，ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ　ｐｒｏｓｐｅｃｔｅｄ　ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｌａｅｔｏｆｅｒｒｉｎ　ｅｘｉｓｔｉｎｇ　ｉｎ　ｂｏｖｉｎｅ　ｅｏｌｏｓｔｒｕｍｓ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ（ＩＸ）；ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ；ｒｅｓｅａｒｃｈ；ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　Ｏ　引　言　牛的初乳中含有极为丰富的生物活性物质，是　提取和利用生物活性物质的最适来源之一。其中乳　铁蛋白（Ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ，ＩＸ）的含量约为１　ｇ／Ｌ，比常乳高　近５０倍。研究表明，Ｉ』是一种多功能蛋白质，具有　子的主体是一个大约有７００个氨基酸残基构成的、　分子量约为８０　ｋｕ的单体蛋白，每个分子中有２个金　属结合位点，每个位点可结合一个Ｆｅ　和一个　ＨＣＯ　一或ＣＯ　一＿２＿　Ｉ。Ｘ射线研究表明，Ｉ』主体呈无　柄银杏叶并列球形结构，铁结合部位在两叶的切入　部分　。　人乳中的乳铁蛋白（ＨＩ』）和牛乳中的乳铁蛋白　广谱抗菌、抗病毒感染作用；能调节体内铁的平　衡；调节骨髓细胞的生成，促进细胞的生长；调节　（ＢＩＸ）是目前研究最多的Ｌ』，其全部氨基酸序列已经　清楚。牛乳Ｉ』的等电点ｐＨ值为８．２左右，较之人　Ｉ』高２个ｐＨ值单位，这使之易于同具酸性特征的组　分结合。根据ｕ结合Ｆｅ　的多寡，可将其分为缺铁　型乳铁蛋白（ａｐｏＬｆ）、铁半饱和型乳铁蛋白和铁饱和　型乳铁蛋白（Ｈｏｌｏｉｘ）三种形式　。不同形式的Ｌｆ具有　机体免疫功能，增强机体抗病能力；抑制人体肿瘤　细胞的生长，具有预防及治疗肿瘤的作用；能同多　种抗生素及抗真菌制剂协同作用，更有效地治疗疾　病。　ｌ　Ｕ的基本结构与理化性质　乳铁蛋白（Ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ，Ｌｆ）又称“乳转铁蛋白”，　不同的抗变性能力，其抗巴氏杀菌热变性能力依次　为：Ｈｏｌｏｉｘ＞铁半饱和型乳铁蛋白＞ａｐｏｉｘ　。‘。Ｉ』的　是一种糖蛋白，属于转铁蛋白家族。尽管有“乳铁　抑菌效果与ｐＨ值密切相关。研究表明，　在中性　蛋白”的称谓，它并非乳汁所特有，在哺乳动物的　很多外分泌物中都存在，如：眼泪、唾液和精液等　¨Ｉ。ＤＨ值下具备较强活力。体系的ｐＨ值为７．４时，效　果明显强于ｐＨ值为６．８，当ｐＨ＜６时，则基本无抑　菌作用。Ｈｉｒｏａｋｉ等人（１９９１）研究过Ｉ』的稳定性与　ｐＨ值、温度之间的关系，质量浓度５０　ｇ／Ｌ的铁不　饱和ｕ溶液在中性、碱性ｐＨ值条件下高于８０℃即　开始发生胶凝。但　在酸性条件下则非常稳定；ｐＨ　值为４．０、９０℃条件下加热５　ｒａｉｎ，ＩＸ的铁结合能力、　抑菌特性几乎无变化；ｐＨ值为２～３、１００～１２０℃　只是除乳中外，其他分泌物中Ｉ』含量甚微。囚　其晶体呈红色，故也有学者称之为收稿日期：２００２—０１—１８　“红蛋白”。分　基本项目：国家自然科学基金资助项目（３０１７０６８５）　作者简介：凌雪萍（１９７７一），女，硕士，从事生物技术方面　的研究。　２００２年第３。卷第４期（总第ｌ４９期）　维普资讯 http://www.cqvip.com 加热５　ｍｉｎ，Ｌｆ分子虽有降解反应，但抑菌作用则明　显增强Ｉ　Ｉ。　体肝细胞的损害，这一结论被Ｈ本国立癌症中心研　究所和京都大学病毒研究所的科研人员经过动物实　验和临床试验在１９９８年研究成果报告中所证实。　２．３　乳铁蛋白具有抗氧化作用　２　Ｕ的生物学功能　近年来，随着生物工程技术的不断发展和成　研究结果显示，乳铁蛋白能抑制铁诱导的脂质　过氧化过程所产生的硫代巴比妥酸和丙二醛的生　熟，许多国家开始注意到乳铁蛋白的实用价值。科　学家们利用分子生物学原理，在实验室完成了对乳　铁蛋白功能的研究，并进行了临床试验，确定了它　对人体所具有的７大功能。　２．１　乳铁蛋白具有广谱抗菌作用　成。另外，牛乳铁蛋白能降解酵母中的ｔＲＮＡ，具有　核糖核酸酶的活性，且能抑制超氧离子的形成。所　有这些都可降低人体内自由基对动脉血管壁弹性蛋　白的破坏，达到预防和治疗动脉粥样硬化和冠心病　的目的Ｉ　・“Ｉ。　１９７２年，Ｂｕｌｌｅｎ等人首先提出了ｕ的抑菌作　用。ｕ属于广谱抑菌剂，既抑制需铁的革兰氏阴性　菌，也抑制革兰氏阳性菌，但基本不抑制对铁需求　不高的菌，如乳酸菌。另外，Ｌｆ对链球菌的变异菌　２．４　乳铁蛋白具有抗癌作用　乳铁蛋白对消化道肿瘤，如结肠癌、胃癌、肝　癌、胰腺癌，具有化学预防作用，并可抑制由此引　发的肿瘤转移。另外，乳铁蛋白在启动宿主防御系　株和霍乱弧菌等有直接的致死效果，这种作用与铁无　关　１。随后的一些研究也都证明了ｕ抑菌效果均与Ｌｆ　结合铁的能力有关。Ｌｆ抑制Ｅ．Ｃｏｌｉ的效果见图１。　统的初始活化反应，调控不同类型淋巴细胞比例的　改变对机体免疫反应的影响，提高免疫力等方面都　起到了促进作用。　２．５　乳铁蛋白调节机体免疫反应　乳铁蛋白具有调节巨噬细胞活性和刺激淋巴细　胞合成的能力；而且嗜中性粒细胞是含乳铁蛋白最　多的细胞，在机体受感染时可以将乳铁蛋白释放出　来，释放出的乳铁蛋白夺取致病菌的铁离子致使后　者死亡。另外，经研究显示，乳铁蛋白对抗体生　按种时间／ｈ　＋添加ｌ　ｇ／Ｌ　Ｌｆ（２０％饱和度）　＋添加ｌ　ｇ／Ｉ　Ｌｆ（１　００％饱和度）　一窄　１组　图ｌ　乳铁蛋白对Ｅ．Ｃｏｌｉ的抑制作用　所以ｕ抑菌效果取决于微生物对铁的需求程　成、Ｔ细胞成熟、淋巴细胞中自然杀伤细胞比例都具　有调节作用Ｉ　Ｉ。　２．６　乳铁蛋白调节胃肠道铁的吸收　乳铁蛋白通过它的氨基和羧基末端两个铁结合　区域能高亲和性地，可逆地与铁结合，并维持铁元　素在一个较广的ｐＨ值范围内完成铁在十二指肠细胞　的吸收和利用。　度、外源铁的生物利用率、Ｌｆ的铁饱和度、盐类、　ｐＨ值、抗体或其他免疫物质、介质等。　目前认为ＩＪｆ的抗菌机理可能有以下３个方面：　首先，Ｌｆ对革兰氏阴性菌和阳性菌的抑菌作用是由　于乳铁蛋白高度结合铁，使细菌失去生长所需的基　本元素铁；其次，Ｌｆ通过氨基末端强阳离子结合区　域，增加细菌细胞膜的通透性，使细菌的脂多糖从　２．７　乳铁蛋白同药物的协同作用　研究显示，乳铁蛋白能同多种抗生素和抗病毒　药物协同作用，减少药物用量，降低抗生素或抗真　菌制剂对人肝、。肾功能的损害。同时，增强体内微　生物对药物的敏感性。　随着乳铁蛋白功能和作用机制的不断阐明和开　外膜渗出，达到直接杀菌作用Ｉ　；另外，ｕ可通过　发应用范围的不断扩大，相信乳铁蛋白将在治疗、　营养补充、保健食品等方面有着广阔的应用前途。　水解得到的抗菌肽来实现抗菌作用Ｉ　一ｏＩ。将Ｌｆ通过　蛋白酶水解获得一些低分子量的肽，这些肽的抗菌　活性大幅度增强，可抑制Ｇ和Ｇ　菌生长，其中包　括一些对ｕ具有抵抗性的菌株。　２．２　乳铁蛋白具有抗病毒作用　３　Ｕ的分离纯化方法　Ｍｏｎｔｒｅｕｉｌ　Ｊ和Ｊｏｈａｎｓｏｎ　Ｂ等于１９６０年从母乳乳　汁分离得到了Ｌｆ。随后，Ｂａｓｅｌｏｌｉｎｉ等科学家在一　些生物体的体液和各种细胞中亦发现了这种蛋白质　并进行了大量的研究Ｉ　１。目前鉴定乳铁蛋白的方法　主要有：免疫双扩散法、酶联免疫检测法（ＥＬＩＳＡ）　等　。　天然的ｕ能够抑制人免疫缺陷病毒和巨细胞病　毒对ＭＴ４细胞和成纤维细胞的病变作用，此外，还　具有抑制流感病毒的活性，主要是因为其碳水化合　物残基上含唾液酸，它干扰病毒对靶细胞的结合和　侵染Ｉ　Ｉ。乳铁蛋白通过抑制病毒进入细胞，减轻对人　最早获得的乳铁蛋白（ｕ）粗制品是在乳过氧化物　Ｖｏ１．３０，Ｎｏ．４　２００２（ｔｏｔａｌ　１４９）　☆　Ｉ　维普资讯 http://www.cqvip.com 酶（ＬＰ）制备中获得的。ｕ和ＬＰ的等电点较为接近，　分别为８．０～８．２和９．２～９．９，在ｐＨ＝６．５时它们　均带正电荷，而其他乳清蛋白组分均带负电荷，阳　离子交换色谱法可以生产出ｕ和ＬＰ混合型基料。　目前主要有以下几种分离方法　’“・　Ｊ：　（１）离子交换色谱法。Ｇｒｏｖｅ最早使用ＤＥＡＥ纤　中，每１００　ｇ质量可生成２．５～３．３　ｍｇ的ｕ。目前人　们计划开发利用转基因奶牛生产人ｕ。据美国卫生　部估计，美国人乳铁蛋白年市场为５０亿美元，但目　前尚无产品上市。　５　乳铁蛋白的开发应用前景展望　人与牛初乳中的ｕ含量均较高，随着泌乳过程　的进行，乳中的ｕ含量开始迅速下降，到达常乳时　则趋于平稳。人初乳Ｌｆ含量约６～８　ｇ／Ｌ，常乳为　２～４　ｇ／Ｌ，而牛初乳ｕ含量约１～５　ｇ／Ｌ＇常乳则　为０．０２～０．３５　ｇ／Ｌ。对人类来说，初乳是母亲产后　维素阴离子交换树脂和磷酸纤维素交换色谱法分离　出较纯的Ｌｆ成分，得到的ｕ的纯度为８１％左右。　（２）亲合色谱法。亲合色谱是一种新兴的分离技　术，通过该方法获得的产品纯度极高。由于其操作　简单、分离效果好、纯度高，且没有生物活性损　失，是生产医药用高纯度ｕ最有效的方法之一。　（３）固定化单克隆抗体法。载有单克隆抗体的免　疫色谱是一种亲和力色谱法，它较成功的实现了Ｌｆ　的一步分离。该方法的优点是分离效果好纯度高，　提供给新生儿的第一份礼物，新生儿摄入后可提高　免疫力，增强体质，但母乳毕竟有限，人类自然要　寻找其他的初乳资源。综合考虑伦理、宗教、消费　习惯以及工业基础等因素，人们转而开发牛初乳资　源，它是迄今为止最为现实的初乳资源。在功能食　品研究中，可以研究通过向婴儿食品中添加从牛初　抗体被固定可重复使用。其缺点是柱的制备工艺复　杂，抗体成本昂贵，难以工业化生产。　（４）超滤法。超滤法操作简便，费用相对低，易　乳中分离纯化获得的ｕ功能性基料使之化”，使母乳化奶粉的研究上一个新台阶。　“母乳　于形成工业化规模，但纯度不如色谱法高。　ｘ，－ｆ分离得到的ｕ可以通过ＳＤＳ—ＰＡＧＥ、Ｎａｔｉｖｅ　我国约有４２０万头牛，除喂养牛犊外，富余牛　初乳应在８～１０万ｔ以上。因此，生产乳铁蛋白的原　料（初乳）廉价、丰富，在我国有生产利用乳铁蛋白　的基础，经过广泛和深入的研究，可望实现乳铁蛋　ＰＡＧＥ、ＨＰＬＣ等方法分离纯化　・”　。　４　Ｕ的最新研究进展　近年来，对特殊Ｌｆ受体的研究引起人们广泛的　白的工业化生产。同时，ｕ酶解得到的短肽，具有　广谱抗菌活性，它们有望作为一种天然抗菌组分获　得广泛应用Ｉ：：～２４　Ｊ。它们可以用作食品和化妆品的天　然防腐剂，也可作为新一代疗效性食品的功能组　份，防治感染性疾病。因此，牛初乳中乳铁蛋白的　开发利用具有重要意义和广阔的开发前景。　兴趣。Ｃｏｘａ等人Ｉ　叫的研究发现，人的肠道中存在Ｌｆ　受体，而且仅人ｕ可将铁转移至人小肠活组织的粘　膜细胞中，而牛乳铁蛋白以及鸡卵转铁蛋白均无此　功能．这说明小肠粘膜细胞上存在ｕ受体。Ｍａｚｕｒｉｅ　等人（１９８５年）证实，兔小肠绒毛膜上也存在ｕ受　体。Ｋａｗａｋａｍ等人（１９９１年）发现人胎儿和婴儿的小　肠绒毛细胞上存在ｕ受体。Ｇｉｓｌａｓｏｎ等人（１９９３年）　发现．小猪小肠上也存在ｕ的特殊受体。进一步研　究发现乳铁蛋白具有受体特异性，人的ｕ受体只能　结合人ｕ，小猪的ｕ受体只能结合猪Ｌｆｏ另外，在　单核白细胞、嗜中性白细胞、Ｂ一淋巴细胞和巨细胞　参考文献：　【１】ＹＡＭＡＵＣＨ１　Ｋ，ＴＯＭ１ＴＡ　Ｍ，Ｇ１ＥＨＬ　Ｔ，ｅｔ　ａ１．Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ　ａｎｄ　ａ　ｐｅｐｓｉｎ—ｄｅｒｉｖｅｄ　ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｆｒａｇｍｅｎｔ［Ｊ］．　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，１９９３，６１（２）：７１９—７２８．　［２】曹劲松．初乳功能性食品［Ｍ］　北京：中国轻工业出版社，２０００．　【３】ＮＡＧＡＳＡＫＯ　Ｙ，ＳＡ１ＴＯ　Ｈ，ＴＡＭＵＲＡ　Ｙ，ｅｔ　ａ１．１ｒｏｎ—ｂｉｎｄｉｎｇ　ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　谱系的其他细胞上也发现了ｕ的受体”　。目前人们　还不能准确定义ｕ受体的确切作用，但至少可以说　明ｕ在铁的代谢中起着重要的调节作用，可提高铁　的生物利用率。这引起了科学家对在婴儿配方食品　中添加牛乳ｕ是否会提高婴儿对铁的吸收率的临床　研究，但尚未有进展。　ｏｆ　ｂｏｙｉｎｅ　ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ　ｉｎ　ｉｒｏｎ，ｒｉｃｈ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ［Ｊ】．Ｊ　Ｄａｉｒｙ　Ｓｃｉ，１９９３，７６：　１　８７６—１　８８１．　【４】顾瑞霞．乳与乳制品的生理功能特征【Ｍ】．北京：中国轻工业出　版社，２０００．　【５】ＤＩＯＮＹＳＩＵＳ　Ｄ，Ｍ１ＬＮＥ　Ｊ　Ｍ．Ｆｏｒｍｓ　ｏｆ　Ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ：Ｔｈｅｉｒ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｇｅｎｉｃ　ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ［Ｍ】．Ｊ　Ｄａｉｒｙ　Ｓｃｉ，１９９３，７６：　２　５９７—２　６０６．　此外，近年来人们也在尝试着克隆整个ｕ基　因，但尚未成功，可能是因为要表达的ＤＮＡ片段太　大，编码ｕ的基因大约有２　０００对碱基对长…　。最　【６】ＹＯＳＨ１ＤＡ　Ｓ，ＷＥＬ　Ｚ，ＳＨ１ＮＭＵＲＡ　Ｙ，ｅｔ　ａ１．Ｓｐｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ—ａ　ａｎｄ．ｂ　ｆｒｏｍ　ｂｏｖｉｎｅ　ｃｏｌｏｓｔｒｕｍ【Ｊ】．Ｊ　Ｄａｉｙ　Ｓｃｉ，２０００，８３：２　２１ｒ　１—　２　２１５．　近日本农水省生物资源研究所等单位开发出一种基　因重组番茄。他们将人体乳腺中产生的ｕ基因导入　了番茄品种“秋玉”之中。实践表明，番茄“秋　玉”的果实、叶、根的部分能生成ｕ，在其果实　【７】ＫＡＷＡＫＡＭ１　Ｈ，Ｈ１ＲＡＴＳＵＫＡ　Ｍ，ＤＯＳＡＫＯＹ　Ｓ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｉｒｏｎ—ｓａｔｕｒａｔｅｄ　ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ　ｏｎ　ｉｒｏｎ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ［Ｊ】Ａｇｉｌｅ　Ｂｉｏｌ　Ｃｈｅｍ，１９８８，５２（４）：　９０３—９０８．　２ｏ０２年第３。卷第４期（总第ｌ４９期）　维普资讯 http://www.cqvip.com 【８】ＥＬＬＩＳＯＮ　Ｒ　Ｔ，ＧＩＥＣＨＬ　Ｔ　Ｊ，ＬＡＦＯＲＣＥ　Ｆ　Ｍ．Ｄａｍａｇｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｏｕｔｅｒ　ｍｅｍｂｒａｎｅ　ｏｆ　ｅｎｔｅｒｉｃ　ｇｒａｍ－－ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｂｙ　ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ　ａｎｄ　ｔｒａｎｓ－－　ｂｏｖｉｎｅ　ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ【Ｊ】．Ｊ　Ｄａｉｙ　Ｓｃｉ，１９９１，７４：４　１３７—４　１４２．ｒ　【１　８　１　ＤＩＯＮＹＳＩＵＳ　Ｄ　Ａ，ＨＥＲＳＥ　Ｊ　Ｂ，ＧＲＩＥＶＥ　Ｐ　Ａ．Ｅｘｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌａｃｔｏｐｅｒｏｘｉ．　ｄａｓｅ　ａｎｄ　ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ　ｆｒｏｍ　ｗｈｅｙ　ｕｓｉｎｇ　ｂａｔｃｈ　ｉｏｎ　ｅｘｃｈａｎｇｅ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ　ｆｅｒｒｉｎｇ［Ｊ】．Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，ｌ９９８，５６：２　７７４—２　７８１．　【９】ＪＯＮＥＳ　Ｅ　Ｍ，ＳＭＡＲＴ　Ａ，ＢＬＯＯＭＢＥＲＧ　Ｇ，ｃｔ　ａ１．Ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｃｉｎ，ａ　ｎｃｗ　ａｎｔｉｍｉｃｍｂｉａｌ　ｐｅｐｔｉｄｅ【Ｊ】．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ，１９９４，７７：　２０８—２１４．　【Ｊ】．Ｔｈｅ　Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｄａｉｒｙ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１９９１（９）：７２—７５．　【１９】ＡＢＥ　Ｈ．Ｈｅａｔ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｂｏｖｉｎｅ　ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ　ａｔ　ａｃｉｄｉｃ　ｐＨ［Ｊ】．Ｊ　Ｄａｉｒｙ　Ｓｃｉ，１９９１，７４：６５—７１．　【１０】ＤＩＯＮＹＳＩＵＳ　Ｄ　Ａ，Ｍ１ＬＮＥ　Ｊ　Ｍ．Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｐｃｐｔｉｄｅｓ　ｏｆ　ｂｏｖｉｎｅ　ｌａｃｔｏ—　ｆｅｒｒｉｎ：ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ【Ｊ　Ｊ　Ｊ　Ｄａｉｒｙ　Ｓｃｉ，１９９７，ｇ０：　６６７—６７４．　【２０】ＣＯＸ　Ｔ　Ｍ．Ｉｒｏｎ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ａｎｄ　ｉｎｆｌｕｘ　ｏｆ　ｉｒｏｎ　ａｃｒｏｓｓ　ｔｈｅ　ｄｕｏｄｅｎａｌ　ｂｒｕｓｈ　ｂｏｒｄｅｒ．Ｅｖｉｄｅｎｃｅ　ｆｏｒ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｌａｃｔｏｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ　ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ【Ｊ】．Ｂｉｏｃｈｉｍ　Ｂｉｏｐｈｙｓ　Ａｃｔａ，１９７９，５８８：１２０．　【２　１】ＳＣＨＡＮＢＡＣＨＥＲ　Ｆ　Ｌ，ＧＯＯＤＭＡＮ　Ｒ　Ｅ，ＴＡＬＨＯＵＫ　Ｒ　Ｓ．Ｂｏｖｉｎｅ　ｍａｍ—　ｍａｒｙ　ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｆｒｏｍ　ｍｅｓｓｅｎｇｅｒ　ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｉｃ　ａｃｉｄ（ｍＲＮＡ）　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ａｎｄ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｃｏｎｔｒａｒｙ　ｔｏ　ｏｔｈｅｒ　ｍｉｌｋ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ【Ｊ】．Ｊ　Ｄａｉｙ　ｒＳｃｉ，１９９３，７６：３　８１２—３　８３１．　【１１】郭本恒，程玉倩，骆承庠．乳铁蛋白【Ｊ　Ｊ．中国乳品工业．１９９５，　２３（３）：Ｉ１７—１２０．　【１　２】ＲＩＣＨＩＥ　Ｅ　Ｒ，ＨＯＬＬＩＡＲＤ　Ｊ　Ｋ，ｅｔ　ａ１．Ｈｕｍａｎ　ｍｉｌｋ—ｄｅｒｉｖｅｄ　ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ　ｉｎｈｉｂｉｔｓ　ｍｉｔｏｇｅｎ　ａｎｄ　ａｌｌｏａｎｔｉｇｅｎ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｈｕｍａｎ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａ－　ｔｉｏｎ【Ｊ　Ｊ．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ　ｌｍｍｕｎｏｌｏ￣，１９８７，１２：１　３７—１４８．　【１　３】ＡＰＰＥＬＭＥＬＫ　Ｂ　Ｊ．Ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ　ｉｓ　ａ　ｌｉｐｉｄ　ａ－ｂｉｎｄｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ【Ｊ】．Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，１９９４，６２：２　６２８—２　６３２．　ｆ　２２】ＢＥＬＬＡＭＹ　Ｗ，ＴＡＫＡＳＥ　Ｍ，ｗＡＫＡＢＡＹＡＳＨｌ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｓｐｅｃｔｒｕｍ　ｏｆ　ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｃｉｎ　Ｂ，ａ　ｐｏｔｅｎｔ　ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｄｅｒｉｖｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　Ｎ—ｔｅｒｍｉｎａｌ　ｒｅｇｉｏｎ　ｏｆ　ｂｏｖｉｎｅ　ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ【Ｊ】．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ，１９９２，７３：４７２—４７９．　ｆ１４】张英华．酶联免疫法测定牛初乳中乳铁蛋白含量【Ｊ】．中国乳品　工业，１９９９，２７（６）：１９—２０．　【２３】ＳＨＩＮ　Ｋ，ＹＡＭＡＵＣＨＩ　Ｋ．Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｂｏｖｉｎｅ　ｌａｅｔｏｆｅｒｒｉｎ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｐｅｐｔｉｄｅｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ｅｎｔｅｒｏｈａｅｍｏｒｒｈａｇｉｃ　Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　０１５７：Ｈ７　【１５】龚广予．一种检测乳铁蛋白的方法【Ｊ　Ｊ．中国乳品工业，２００１，２９　（３）：２７—２９．　【Ｊ】．Ｔｈｅ　Ｓｏｃｉｅｔｙ　ｆｏｒ　Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９９８，２６：４０７—４１　１．　【２４　ＪＷＡＫＡＢＡＹＡＳＨＩ　Ｈ，ＢＥＬＬＡＭＹ　Ｗ　Ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｌｉｓｔｅｒｉａ　ｍｏｎｏｃｙｔｏ－　ｇｅｎｅｓ　ｂｙ　ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｃｉｎ，ａ　ｐｏｔｅｎｔ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｄｅｒｉｖｅｄ　ｆｒｏｍ　【１６】唐传核．乳铁蛋白最新研究进展ＩＪ】．中国乳品工业，２０００，２８　（３）：１４—１７．　【ｌ７】ＴＯＭＩＴＡ　Ｍ．Ｐｏｔｅｎｔ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｇｅｎｅｒａｔｅｄ　ｂｙ　ｐｅｐｓｉｎ　ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ　ｏｆ　ＣＯＷ’Ｓ　ｍｉｌｋ【Ｊ】．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，１９９２，５５（４）：２３８—２４０　汕头市金砂企业（集团）金砂化工厂　食品添加剂　乙二胺四乙酸二钠（ＥＤＴＡ二钠）　［符合Ｑ／ＳＴＪＳ０２］　２ｌ　５００元／ｔ　１０　５００元／ｔ　１０　５００元／ｔ　４　２００元／ｔ　磷酸二氢钾［符合Ｑ／ＳＴＪＳ０４］　磷酸氢二钾［符合Ｑ／ＳＴＪＳ０３］　氯化钾［符合ＤＸ／４４００００×４２１］　磷酸氢二钠［符合ＨＧ／Ｔ２９２０］　厂　址：汕头市金园路二横７号　联系人：吕本杰，吕焕伦　４　０００元／ｔ　开户帐号：；　汕头市工商行汕樟支行ｎｔｏｕ．行ｇＯ　　２”００３０２０６０９０２４５５２６２０　１　Ｉ　】　Ｖｏ１．３０，Ｎｏ．４　２００２（ｔｏｔａｌ　１４９）　☆