气相色谱-质谱联用测定黔产金钗石斛精油成分研究

ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　ＡＮＤ　ＭＡＴＥＲＩＡ　ＭＥＤＩＣＡ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　２０１０　ＶＯＬ．２１　ＮＯ．４　时珍国医国药２０１０年第２１卷第４期　了壁虎醇提物对人食管鳞癌细胞ＥＣ９７０６增殖抑制作用，结果表　重要的生理意义。本研究结果表明壁虎醇提取物能够诱导人食　明壁虎醇提取物在５．５～８　ｍｇ／ｍｌ剂量下体外以剂量和时间依赖　管癌细胞株ＥＣ９７０６凋亡，增强Ｂａｘ的蛋白表达、通过升高Ｂａｘ／　性的方式抑制人食管癌细胞株ＥＣ９７０６增殖。光镜下可见细胞　Ｂｃｌ一２比值而实现对ＥＣ９７０６细胞增殖和凋亡的调节。　随着药物浓度增加，细胞数目逐渐减少，细胞体积逐渐变小变圆，　综上所述，壁虎醇提取物对人食管癌ＥＣ９７０６细胞株增殖有　直至细胞碎裂。Ｇｉｅｍｓａ染色可见凋亡细胞体积缩小，细胞核表　抑制作用，药物作用效果具有较明显的时一效和量一效关系，其　面不光滑、皱缩，形态不规则，核染色质固缩，核深染。　抑制作用可能通过上调Ｂａｘ的表达，通过改变Ｂａｘ／Ｂｅｌ一２的比　值而诱导细胞凋亡。本实验中所用的醇提取物乃是一种混合物，　其抑制肿瘤作用主要由一种成分起作用还是由多种成分协同起　作用，有待进一步研究。　参考文献：　［１］杨金霞，王学美．壁虎治疗肿瘤的研究进展［Ｊ］．世界华人消化杂　志，２００６，１４（４）：２４２８．　［２］　张飞春，李中信，杜文平．守宫抗肿瘤研究进展［Ｊ］．河北中医，　２００９，３１（ｉ）：１４４．　Ｆｅｉ　Ｌｉｕ，Ｊｉａｎ—Ｇａｎｇ　Ｗａｎｇ，Ｓｈｕ—Ｙｉｎｇ　Ｗａｎｇ．Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ｅｆｆｅｃｔ　ａｎｄ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　Ｇｅｃｋｏ　ＯＦｔ　ｈｕｍａｎ　ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅｓ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ａ—Ｉ碉性对照ｂ－丝裂霉素Ｃ２０　Ｉｘ，ｇ‘ｍｌ　［　ｆ（　．壁虎醇提物６　ｍｇ・ｍｌ　ｄ一壁虎醇提物７　ｍｇ・ｍｌ　图４免疫组化Ｓ—Ｐ法壁虎醇提物Ｂｃｌ一２的蛋白表达（４００×）３　　］　ａｎｄ　ｘｅｎｏｇｒａｆｔｅｄ　ｓａｒｃｏｍａ　１８０　ｉｎ　Ｋｕｎｍｉｎｇ　ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｗｏｒｌｄ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２００８，１４（２５）：３９９０．　ｊ４　刘菲，王建刚，席守民，等．中药壁虎抗肿瘤作用的实验研究［Ｊ］．　５　６　７　８　９　Ｈ　时珍国医国药，２００８，１９（４）：９５７．　刘菲，王淑英，李艳，等．干壁虎对食管癌细胞和Ｓ１８ｏ荷瘤小　鼠的抑制作用［Ｊ］．中药材，２００８，３１（９）：１３０４．　司徒镇强，吴军正，刘版公司，２００７：２００．　斌，等．细胞培养［Ｍ］．西安：世界图书出　　ｊ　一　　『　［　细胞凋亡是一种非常复杂的生理和病理过程，是受控于基因　指导的主动性细胞自我消亡过程，是细胞固有的功能。其形态特　征包括细胞固缩、染色质聚集、边集至核膜下及凋亡小体形　成‘　。现在普遍认为，无论药物的靶点何在，多种化疗药物最终　主要通过诱导肿瘤细胞凋亡或坏死而达到治疗目　Ｊ。凋亡的线　粒体通路主要由Ｂｃｌ一２家族成员所调控，该家族可分为两个亚　群：一个亚群Ｂｅｌ一２，Ｂｉｄ，Ｂｃｌ—Ｘ，Ｂｃｌ—Ｗ等抗凋亡蛋白组成；另　个亚群由Ｂａｘ，Ｂａｋ，Ｂｉｋ，Ｂｃｌ—ＸＳ等促凋亡分子组成　。下调　Ｂｃｌ～２或上调Ｂａｘ可促进多种因素诱导的多种肿瘤细胞凋亡，　反之则抑制肿瘤细胞凋亡　１０］，Ｂｃｌ一２蛋白与Ｂａｘ蛋白的比值直　一Ｔａｍｍ　１，Ｓｅｈｒｉｅｖｅｒ　Ｆ，Ｄｏｒｋｅｎ　Ｂ．Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｂａｓｉｃ　ｒｅ—　ｓｅａｒｃｈ　ｆｏｒ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｏｎｔｏｌｏｇｙ［Ｊ］．Ｌａｎｃｅｔ　Ｏｎｅｏｌ，２００１，２（１）：３３．　Ｓｖｋｉｏｔｉｓ　ＧＰ，Ｐａｐａｖａｓｓｉｌｉｏｕ　ＡＧ　Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ：ｔｈｅ　ｓｕｉｃｉｄｅ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｉｎ　ｃａｎｃｅｒ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｅｘｐｅ￣Ｏｐｉｎ　Ｉｎｖｅｓｔｉｇ　Ｄｒｕｇｓ，２００６，　１５ｆ６）：５７５．　Ｃｏｒｙ　Ｓ，Ａｄａｍｓ　ＪＭ．Ｋｉｌｌｉｎｇ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌｓ　ｂｙ　ｆｌｉｐｐｉｎｇ　ｔｈｅ　Ｂｃｌ一２／Ｂａｘ　ｓｗｉｔｃｈ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ　Ｃｅｌｌ，２００５，８（１）：５．　Ｈｅｎｇａｒｔｎｅｒ　Ｍ　０．Ｔｈｅ　ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｏｆ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，２０００，４０７　（６８０５）：７７０．　接影响着细胞受到刺激后发生凋亡的比率，两者的平衡是决定细　胞死亡和存活的重要因素。因此，Ｂａｘ，Ｂｃｌ一２蛋白表达比例具有　气相色谱一质谱联用测定黔产金钗石斛精油成分研究　黄小燕，乙　引　，张习敏，杨立昌，徐小蓉　（贵州师范大学生命科学学院，贵州贵阳５５０００１）　摘要：目的探索黔产金钗石斛精油成分。方法采用水蒸气蒸馏方法提取金钗石斛精油，以气相色谱一质谱联用（ＧＣ—　ＭＳ）技术结合计算机检索对其化学成分进行分离鉴定，按面积归一法计算各化学成分的相对含量。结果４个产地金钗　石斛均含有甲安菲他明、Ｂ一蒎稀、莰烯、桉叶油素、芳樟醇、雪松醇、环己醇、安息香酸等成分，此外，赤水产金钗石斛精油　中萜类和倍半萜类较多，而其它三地出产的金钗石斛醇类、烯类、烷烃类化合物居多。结论各产地金钗石斛精油成分含　量不同。　关键词：金钗石斛；精油；　气相色谱～质谱联用法　中图分类号：Ｒ２８２．７１　文献标识码：Ｂ　文章编号：１００８－０８０５（２０１０）０４－０８８９－０２　祛风除湿、活血化瘀、祛寒温里、清热解毒、解暑祛秽、杀虫抗　精油（ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌｓ）是一类在常温下能挥发的、可随水蒸气　痛、食品和化妆品工业。　蒸馏的、与水不相混溶的油状液体的总称。大多数精油具有芳香　菌等作用，被广泛应用于临床、气味，是一类重要的活性成分，具有发散解热、芳香开窍、理气止　作为名贵中药，金钗石斛Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ　ｎｏｂｉｌｅ在《神农本草经》　和《本草纲目》中被列为上品，具有益味生津、滋阴清热、明目利　收稿日期：２００９￣６－３０；修订日期：２００９—１２－２８　嗓等功效，用于热病伤津、口干烦渴、病后虚热等多种病症。目　基金项目：国家科技攻关计划项目（Ｎｏ．２０Ｃ４ＢＡ７２１Ａ３３）；　前，金钗石斛有效成分研究主要集中在生物碱和多糖。此外，研　责州省教育厅自然科学类科研项目（Ｎｏ．［２００７］０１８）；　究还发现金钗石斛具有某些抗癌活性成分，如Ｓｔｉｌｂｅｎｏｉｄｓ类、菲　贵州省中药现代化科技产业研究开发专项（Ｎｏ．［２００９］５０４３）　类和联苄类物质　以及抗血小板凝集作用的化合物，如石斛酚　作者简介：黄小燕（１９７６．），女（汉族），贵州贵阳人，现任贵州师范大学生　二醋酸盐　。贵州是金钗石斛药材的传统产地，赤水金钗石斛　命科学学院副教授，硕士学位，主要从事药用植物学研究工作．　于２００５．１２通过国家地理标志产品保护的专家审查，成为贵州省　通讯作者简介：乙引（１９６７一），男（汉族），重庆人，现任贵州师范大学　第一个获得原产地产品保护的中药材产品。目前，赤水金钗石斛　教授，博士学位，主要从事植物学研究工作．　・８８９・　时珍国医国药２０１０年第２１卷第４期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　ＡＮＤ　ＭＡＴＥＲＩＡ　ＭＥＤＩＣＡ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　２０１０ＶＯＬ．２１　ＮＯ．４　　ｃ中几个主峰所代表的化合物分别是咪唑、乙　与贵州其他产地金钗石斛精油成分之间的比较还未见报道。本　十六碳烯酸等，图１文拟通过对贵州不同产地金钗石斛精油成分的ＧＣ—ＭＳ研究，比　酰胺、芳樟醇、环己醇、茴香醚、乙酰胺等，图ｌｄ中几个主峰所代　较不同产地金钗石斛精油成分的异同，为金钗石斛鉴别和开发提　表的化合物分别是桉叶油素、咪唑、雪松烯、罗汉柏烯、芳樟醇氧　供理论和实验依据。　化物等。　１材料　３．２黔产金钗石斛精油组分的比较分析４个产地金钗石斛精　金钗石斛Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ　ｎｏｂｉｌｅ分别采收于贵州省赤水、罗甸、独　油的化学成分及其相对含量见表１。　山和兴义４地，均为３年生鲜品。超声清洗仪（ＫＳ—ＩＯ００Ｄ）；气相　结果表明，不同产地金钗石斛精油的成分存在一定差异。　色谱一质谱联用仪（ＳＨＩＭＡＤＺＵ　ＱＰ２０１０）。所用试剂均为色谱纯。　在已鉴别出的４７种化合物中，４个产地金钗石斛精油中均含　２方法　有的成分有甲安菲他明（兴奋剂）（１．３２％一２．１Ｏ％）、ｐ一蒎　２．１精油提取取金钗石斛茎３００　ｇ，切成薄片，粉碎，过４０目　稀（１．２９％～７．３１％）、莰烯（０．８６％～６．４１％）、桉叶油素　筛，常压水蒸气蒸馏提取８　ｈ，用乙醚萃取２次，无水硫酸钠除水　（０．３８％～１　８．６８％）、雪松醇（０．２８％一１．４１％）、环己醇（０．　分，过滤，获得具有特殊气味的乳白色油状物。　１２％～ｌ２．５０％）、安息香酸（０．０９％一１．１５％）等，但以桉叶　２．２　ＧＣ—ＭＳ分析　油素在精油中含量较高，为１８．６８％。此外，其他成分在各产　２．２．１　气相色谱条件色谱柱Ｐｈｅｎｙｌ　Ｍｅｔｈｙｌ　Ｓｉｌｏｘａｎｅ（３０　ｉｎ　ｘ　地金钗石斛中的含量和种类均不相同，其中，赤水产金钗石斛　０．２５　ｍｍ×０．２５　ｔｘｍ）。采用程序升温，５０℃保持１　ｒａｉｎ，以６￣Ｃ／　精油中萜类和倍半萜类居多，而其它３地出产的金钗石斛醇　ｍｉｎ上升至１００℃，然后以３ｏＣ／ｍｉｎ上升至１８０ｏＣ，再以２０ｏＣ／ｍｉｎ　类、烯类、烷烃类化合物居多。　上升至２６０℃，恒温５　ｍｉｎ。汽化室温度２５０℃，载气为高纯Ｈｅ　（９９．９９９％），柱前压５１．９８　ｋＰａ，载气流量１．０　ｍＬ／ｍｉｎ，进样量１　ｌ，分流比２０：１。　２．２．２质谱条件离子源为ＥＩ源，离子源温度２３０￣Ｃ，四极杆温　度１５０℃，电子能量７０　ｅＶ，发射电流３４．６　Ａ，倍增器电压１　２９４　Ｖ，接口温度２８０ｏＣ，溶剂延迟５　ｒａｉｎ，质量范围１０～５５０　ｍＡＵ。　３结果　表ｌ　不同产地金钗石斛精油的化学成分　编号　１　２　３　４　成分　Ｃｙｃｌｏｂｕｔａｎｏｌ（环丁醇）　分子式—　—塑鼍鱼量　ＣｌｏＨ１６　Ｃ７Ｈ１２０　Ｃ６Ｈ１２　Ｃ４Ｈ８０　８一Ｍｙ￣ｅｎｅ（月桂烯）　２一Ｈｅｐｔｅｎａｌ（庚烯）　ｃｙｃＪｏｈｅｘａｎｅｍｅｔｈ（甲安菲他明）　０．２４　一　一　一　一　一　３．３１　４．６３　１．３２　１．３３　０．９８　２．１０　—０．６６　０．４Ｏ　一　３．１黔产金钗石斛精油组分的ＧＣ—ＭＳ图谱用ＧＣ—ＭＳ联用　仪对总离子流色谱图进行分析和处理，根据相应的ＭＳ图谱，用　ＮＩＳＴ谱库系统检索，确定化学成分，并用峰面积归一法计算各组　分的相对含量。见图１，表１。　ａ　５　Ｅｕｃａｌｙｐｔｏｌ（桉叶油素）　ＣＩｏＨＩ８０　１８．６８　ｌ５　４６　０．３８　０．６８　６３一Ｈｅｘｅｎ一１一ｏｌ（３一乙烯～２一乙醇）ＣｌｏＨ￣６　０．３７　一　一　一　７　Ｂ—Ｐｉｎｅｎｅ（Ｂ一蒎稀）　ＣＩｏＨＩ６　７　３ｌ　５　１２　３．２８　１．２９　８　Ａｃｅｔａｍｉｄｅ（乙酰胺）　Ｃ３Ｈ４Ｎ２０　—０．５４　１２．５５　—　９　Ｉｍｉｄａｚｏｌｅ（咪唑）　Ｃ６Ｈ７Ｎ３０２　１．４１　—４．４９　２０．１０　１Ｏ　４一Ｃａｒｅｎｅ（蒈烯）　ＣｉｏＨ１６　５．３８　５．１５　４．０５　１．２５　１　１　Ｅｔｈｙｌａｍｉｄｅ（氨基乙烷）　ＣｓＨＩ２Ｎ２ｏ　一　２．５２　一　一　１２　Ｃｙｃｌｏｂｕｔａｎｅ（环丁烷）　Ｃ１０Ｈ１６　１．８１　一　一　一　１３　Ｃａｍｐｈｅｎｅ（莰烯）　ＣＩｏＨＩ６　５．７６　６　４１　４．３７　０．８６　１４　Ｏｌｅｉｃ　Ａｅｉｄ（油酸）　Ｃｌ８Ｈ　０　０．３４　一　一　一　１５　１．４一Ｂｕｔａｎｅｄｉｏｌ（丁二醇）　Ｃ６Ｈ１００２　０　３５　一　一　一　１６　Ｓｅｍｉｃｃａｒｂａｚｉｄｅ（　巴肼）　Ｃｌ４Ｈ２３Ｎ３０２　０　４８　０．０８　一　一　．Ｌ　．．…　Ｉｊ．　ＶＩ　ｌ　Ｉ　＾　．　１７　Ｌｉｎａｌｏｏｌ　ｏｘｉｄｅ（芳樟醇氧化物）　ＣｓＨ　１６０　一　一ｌ５．７６　３．３５　１８　Ｎｏｎｙｌ　ｉｏｄｉｄ（１一碘壬烷）　Ｃ９Ｈ１９１　—０．０５　一　一　１９　Ｐｒｏｐａｎｅｄｉｏｉｃ（丙二酸）　Ｃ／３Ｈ６０２　０．１０　０．４８　一　一　２０　Ｂ～Ｌｉｎａｌｏｏｌ（１３一芳樟醇）　Ｃｔ０ＨｔｓＯ　１．６８　１．１２　—　３．５７　２１　Ｏｃｉｍｅｎｅ（罗勒烯）　ＣＩｏＨ１６　１．１９　一　一　一　２２　Ｐｅｎｔａｎｏｉｃ　ａｃｉｄ（戊酸）　Ｃ１ｏＨ１８０　０．８１　一　一０．７５　２３　１　２一Ｂｅｎｚｅｎｅｄｉｃａｒｂｏ　ｙｌｌｃ（苯二甲酸）Ｃ７Ｈ６０２　—０．６９　０．７３　—　２４　１．６一Ｏｃｔａｄｉｅｎ一３一ｏｌ（辛二烯）　ＣｓＨ１４　０．４４　一　一　一　２５　２一Ｏｃｔｅｎｏｌ（辛醇）　ＣｓＨ１４￣　一　５．３５　０　２４　０．２０　２６　Ｃａｍｐｈｏｒ（樟脑）　ＣｌｏＨ１６０　３．３８　—　３．５７　—　２７　Ｍｅｔｈｙｌ　ｓａｌｉｃｙｌａｔｅ（水杨酸酯）　Ｃ７ＨｓＯ３Ｒ　０．４６　１．４６　１．４６　２．７ｌ　２８　Ｉｓｏｂｏｍｖｌ　ｆｏｒｍａｔｅ（甲酸异冰片酯）ＣＩ１Ｈ１８０２　一　一４．２７　２．９７　２９　Ｃｙｅｈｅｘａｎｏｎｅ（环已酮）　Ｃ１０ＨＩ６０　一　一　２．Ｉ３　２．４３　３Ｏ　Ｃ）ｃｌｏｈｅｘａｎｏｌ（环己醇）　ＣｔｏＨ２ｏ０　０．１２　１．３５　ｌ２　５０　０．９５　３１　Ｃｈｏｌｅｓｔａｎ一３一ｏｎｅ（ＨＨ甾烷三酚）　Ｃ２９Ｈ５ｏＯ２　０．９７　一　一　一　３２　Ｃｅｄｒｅｎｅ（雪松烯）　ＣＩ５Ｈ２４　２．０５　２．３０　—　９．２７　３３　Ｔｈｕｊｏｐｓｅｎｅ（罗汉柏烯）　Ｃ１５Ｈ２４　５．１３　３．５６　４　２３　６．３５　３４　Ｐａｌｍｉｔｉｃ　ａｃｉｄ（棕榈酸）　Ｃ１６Ｈ３２０２　０．７９　一　一　一　３５　Ｂｏｍｅｌ（龙腑）　Ｃ】４Ｈｊ７Ｆ７０２　１．１１　—　１．８４　１．２５　３６　４一Ｈｅｘｅｎ一１一ｏｌ（乙烯醇）　ＣＩｏＨｔ８０　一　一０．１７　０．１７　３７　Ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｏｌ（肌醇）　Ｃ６ＨＩ２０　一　一　一０．４７　３８　９一Ｈｅｘａｄｅｃｅｎｏｉｃ　ａｃｉｄ（ｒ六碳烯酸）Ｃ１６Ｈ３ｏＯ２　０．３７　８．５６　０．２７　０．１６　３９　Ｂｅｎｚｏｉｃ　ａｃｉｄ（安息香酸）　Ｃ１５Ｈ２１Ｎ３０２　０　２４　１．１５　１．１１　０．０９　４０　４一Ｉｓｏｂｅｎｚｏｆｕｒａｎｏｌ（蚕　酮）　Ｃ１ｏＨｌ８０２　一　一　一０．８７　４１　Ａｎｉｓｏｌｅ（茴香醚）　ＣｌｏＨ１２￣　一　一　７．６４　—　４２　４３　４４　４５　４６　Ｂｅｈｅｎｙｌ　ｃｈｌｏｒｉｄｅ（ＩＪＪ嵛醇）　Ａｒｉｓｔｏｌｅｎｅ（碘化百里香酚）　Ｃｏｌｕｍｉｂｉｎ（咖伦巴根苷）　Ｃｅｄｒｏｌ（雪松醇）　Ｐｅｎｔｄｅｃａｎｏｉｃ（十五烯二酸）　Ｃ２２Ｈ４５ｃ１　一　一　一　Ｉ．２１　ＣＩｓＨ２４　１　２８　一　一　一　Ｃ２ｏＨ２２０６　０　５８　一　一　一　Ｃ１５Ｈ２６０　１．４ｌ　０．２８　０．８３　０．４７　Ｃ１５Ｈ２ｏＯ２　—０　３５　一　一　ａ一赤水产金钗石斛　ｂ．罗甸产金钗石斛　ｃ一兴义产金钗石斛　ｄ．独山产金钗石斛　图１　４个产地金钗石斛精油的ＧＣ—ＭＳ图谱　！！　确　！　！　！型（笠茎三　堕２　坚２§　：　！　：！　＝　＝　Ａ：赤水产金钗石石斛；Ｂ：罗甸产金钗石斛；ｃ：兴义产金钗石斛；Ｄ：独山产金钗　图ｌａ中几个主要的峰所代表的化合物分别是桉叶油素、蒈　４讨论　烯、雪松烯、罗汉柏烯、莰烯、ｐ一蒎稀等；图１ｂ中几个主峰所代　黔产金钗石斛精油中含有多种有效成分，不同产地金钗石斛　表的化合物分别是桉叶油素、蒈烯、雪松烯、罗汉柏烯、Ｂ一蒎稀、　精油的成分存在一定差异。在已鉴别出的２９—３０种化合物中，　・８９０・　Ｌ１ＳＨＩＺＨＥＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　ＡＮＤ　ＭＡＴＥＲＩＡ　ＭＥＤＩＣＡ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　２０１０　ＶＯＬ．２１　ＮＯ．４　时珍国医国药２０１０年第２１卷第４期　桉叶油素在精油中含量最高，其次是Ｂ一蒎稀、蒈烯、莰烯、桉叶　斛精油成分的种类和含量，至于它与其他产地金钗石斛精油成分　油素、芳樟醇、龙脑、罗松烯等单萜、倍半萜化合物，分别具有镇　之间是否存在差异，有待于进一步研究。　痉、平喘、强心、镇咳、去痰、抗菌、消炎、抗病毒、抗氧化等作　用　。其他成分在各产地金钗石斛中的含量和种类均不相同，　参考文献：　赤水产金钗石斛精油中萜类和倍半萜类居多。萜类化合物是存　［１］夏春冬，廖学才．石斛药用概述［Ｊ］．实用中医学杂志，１９９８，１４（４）：　在于植物界的一大类化合物，具有多种生物活性，并且是某些中　４５．　药的主要有效成分　’　。而其它三地出产的金钗石斛醇类、烯　［２］　国家药典委员会．中国药典［ｓ］．北京：化学工业出版社，２０００：７０．　类、烷烃类化合物居多，这与出产地的生态环境（土壤、温度、光　［３］周欣．迷迭香挥发性成分的质谱分析［Ｊ］．贵州科学，２００１，２０　照、水等）有关。金钗石斛精油化学成分和含量的差异与其药用　（１）：７８．　价值密切相关，所以在中成药产品质量控制中，应确定药材的产　［４］　彭锐，范俊安．石斛属药用植物种质资源研究进展［Ｊ］．时珍国医　地。本文仅研究了贵州赤水与兴义、独山、罗甸４个产地金钗石　国药，２００１，１２（３）：２７３．　血红素加氧酶／一氧化碳系统在百令胶囊水提物对　抗ＳＴＺ损伤大鼠胰岛细胞的作用　（１．重庆医科大学，兰海涛　，郑重庆４０００１倩　６；　，王亚平　，刘　红　２．川Ｉ北医学院，四川南充６３７００７）　摘要：目的观察百令胶囊（Ｃｏｒｂｒｉｎ　Ｃａｐｓｕｌｅ，ｃｃ）水提物对胰岛细胞的保护作用及其机制与血红素加氧酶／一氧化碳系统　的关系。方法Ｗｉｓｔａｒ大鼠腹腔注射链脲佐菌素（Ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ，ＳＴＺ）建立Ｉ型糖尿病模型，腹腔注射ＣＣ水提物和（或）　ＨＯ的特异抑制剂锌原卟啉（Ｚｉｎｃ　ｐｒｏｔｏｐｏｒｐｈｒｉｎ　ＩＸ，ＺｎＰＰ），分糖尿病组（ＤＭ）、正常对照组（ＮＣ）、ＣＣ水提物组、ＣＣ水提物　组＋ＺｎＰＰ，２８　ｄ后检测血糖，血清胰岛素分泌量、ＣＯ含量、ＨＯ一１活性。离体培养乳鼠的胰岛细胞，检测ＳＴＺ、ＣＣ以及　ＺｎＰＰ作用后细胞活性、细胞培养上清液中胰岛素的基础、高糖刺激分泌量，细胞ＨＯ一１以及ＣＯ的变化，同时设立正常对　照组。结果经ＣＣ水提物作用后，ＳＴＺ糖尿病大鼠血清中血糖降低，胰岛素增加，ＣＯ、ＨＯ—ｌ水平升高（Ｐ＜０．０１）。ＺｎＰＰ　作用后血清ＨＯ一１水平降低，ＣＯ含量减少。ＳＴＺ与胰岛细胞孵育２０　ｈ后与ＺｎＰＰ加入ＣＣ组，均表现出细胞活性降低，　基础和高糖刺激胰岛素分泌减少；细胞ＨＯ一１活性降低，ＣＯ生成减少（Ｐ＜０．０１）。与ＣＣ共同孵育细胞活性显著升高，　胰岛素基础和高糖分泌量增多，ＨＯ一１活性水平和ＣＯ生成量显著提高（Ｐ＜０．０１）。结论通过实验证实ＣＣ水提物对　ＳＴＺ损伤的胰岛细胞有保护作用，机制与增加ＨＯ一１活性，ＣＯ生成增多有关。　关键词：虫草茵丝；　糖尿病模型；　胰岛；　血红素加氧酶；　一氧化碳　中图分类号：Ｒ２８５．５　文献标识码：Ａ　文章编号：１００８＿（）８０５（２０１０）０４＿（）８９１４）３　Ｒｏｌｅ　ｏｆ　ＨＯ／ＣＯ　ｉｎ　ＳＴＺ　Ｉｎｄｕｃｅｄ　Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ　Ｉｓｌｅｔ　Ｃｅｌｌ　Ｄａｍａｇｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｗａｔｅｒ　Ｅｘ．　ｔｒａｃｔ　ｏｆ　Ｃｏｒｂｒｉｎｓ　Ｃａｐｓｕｌｅ　ＬＡＮ　Ｈａｉ—ｔａｏ　，ＺＨＥＮＧ　Ｑｉａｎ　，ＷＡＮＧ　Ｙａ—ｐｉｎｇ　，ＬＩＵ　Ｈｏｎｇ　（１．Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ　４０００１６，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，Ｎｏｒｔｈ　Ｓｉｃｈｕａｎ　ｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｎａｎｃｈｏｎｇ，６３７００７，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｗａｔｅｒ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　Ｃｏｒｂｆｉｎｓ　Ｃａｐｓｕｌｅ（ＣＣ）ｏｎ　ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ　ｉｓｌｅｔ　ｃｅｌｌ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ—　ｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｃｉｎ（ＳＴＺ）ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｐａｎｃｒｅａｓｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒａｔｓ　ｗｅｒｅ　ｒｅｍｏｖｅｄ　ｔｏ　ｃｏｌｌｅｃｔ　ｉｓｌｅｔ　ｃｅｌｌｓ．Ｔｈｅ　ｃｅｌｌｓ　ｗｅｒｅ　ｉｎｃｕｂａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ＳＴＺ　ｗｉｔｈ／ｏｒ　ＣＣ　ｏｒ　ＺｎＰＰ．Ｃｅｌｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｉｎｓｕｌｉｎ　ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ，ＨＯ一１　ａｃｔｉｖｉｔｙ，ＣＯ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ。Ｔｙｐｅ　１　ｄｉ—　ａｂｅｔｉｃ　ｒａｔｓ　ｍｏｄｅｌ　ｗａｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＳＴＺ，ａｎｄ　ｗａｔｅｒ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ＣＣ　ａｎｄ／ｏｒ　ＺｎＰＰ　ｗｅｒｅ　ｇｉｖｅｎ　ｂｙ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｔｗｅｎｔｙ　ｅｉｇｈｔ　ｄａｙｓ．Ｂｌｏｏｄ　ｇｌｕｃｏｓｅ　ｌｅｖｅｌ　ｗａｓ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｂｙ　ｇｌｕｃｏｍｅｔｅｒ．ＨＯ一１　ａｃｔｉｖｉｔｙ．ＣＯ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｗａｔｅｒ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ＣＣ　ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ　ｉｍｐｒｏｖｅｄ　ｔｈｅ　ｉｓｌｅｔ　ｃｅｌｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｄａｍａｇｅｄ　ｂｙ　ＳＴＺ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ｂａｓｉｃ　ｉｎｓｕｌｉｎ　ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ　ｂｙ　ｈｉｇｈ　ｇｌｕｃｏｓｅ　ｗｅｒｅ　ｉｍｐｒｏｖｅｄ（Ｐ＜０．０５　１．Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ＣＯ　ａｎｄ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｃｏ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｉｎ　ｓｕｐｅｍａｔａｎｔ　ｗｅｒｅ　ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ＳＴＺ　ｄａｍａｇｅｄ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ｏｆ　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｒａｔｓ，ａｎｄ　ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ＣＣ　ｇｒｏｕｐｓ　ａｎｄ　ＳＴＺ　ｄａｍ－　ａｇｅｄ　ｇｒｏｕｐｓ．Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ＨＯ一１　ａｎｄ　ＣＯ　ｗｅｒｅ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｉｎ　ＳＴＺ　ｄａｍａｇｅｄ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｒａｔｓ　ａｓ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｔｏ　ｎｏｒｍａｌ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｗａｔｅｒ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ＣＣ　ｃｏｕｌｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｅｌｅｖａｔｅｄ　ｔｈｅ　ａｂｒｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｈｏｔ　ａｕａｌ　Ｃｏ　ａｓ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｔｏ　ＳＴＺ　ｄａｍａｇｅｄ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｒａｔｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｗａｔｅｒ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ＣＣ　ｐｌａｙｓ　ａ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｒｏｌｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ　ｉｓｌｅｔ　ｃｅｌｌ　ｄａｍａｇｅ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ＳＴＺ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｍａｙ　ｂｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｅｌｅｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＨＯ一１—１　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＣＯ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ　ｓｉｎｅｎｓｉｓ；　Ｉｓｌｅｔｓ　ｏｆ　ｌａｎｇｅｒｈａｎ；Ｔｙｐｅ　１　ｄｉａｂｅｔｓ；　Ｃｙｔｏｐｒｏｔｃｔｉｏｎ；Ｈｅｍｅ　ｏｘｙｇｅｎａｓｅ一１；　Ｃａｒｂｏｎ　ｍｏｎｏｘｉｄｅ　收稿日期：２０¨０９＿ｏ５－ｏ８；　修订日期：２００９４）８—２７　基金项目：四川省科技厅应用基础研究项目（Ｎｏ．０５ＪＹ０２９—０１３）；四川省教育厅重点项目（Ｎｏ．２００５Ａ０８２）　作者简介：兰海涛（１９７０　），男（汉族），四川南充人，现为重庆医科大学高校师资研究生班研究生，学士学位，主要从事造血干细胞研究工作　通讯作者简介：郑倩（１９７１一），女（汉族），重庆人，ＳＥｆｆ）ｑ北医学院副教授，硕士学位，主要从事胰岛细胞保护的药物筛选研究工作．　・８９１・