AMAMFSIs0291(2)  奶  奶制品  有机氯化物  柱色谱分离法

AM-AM-FS-Is-0291(2)

奶和奶制品——残留有机氯化物(农药)的测定

——第二部分：粗萃取物净化和有机氯化物确认的试验方法

1.适用范围：

本方法是ISO 3890的一部分，它提供了一种试验方法，可用于对按ISO 3890-1一般方法得到的萃取物进行提纯。它还给出了测定奶和奶制品中残留有机氯化物的推荐方法，以及验证试验和净化程序。

2.原理概要：

采用ISO 3890-1条款A.6提供的程序，对试样中的有机氯化物及脂肪进行萃取。残渣用二甲基甲酰胺进行分配，再加入硫酸钠溶液，有机氯化物进入正己烷相中。有机相通过中性氧化铝柱，用正己烷为洗提溶剂采用色谱分离原理进行提纯。洗提液经浓缩后用GLC进行检验。

对牛奶和黄油给出了特定的方法。

3.主要仪器和试剂：

3.1.仪器

常规实验室仪器，主要有：Soxhlet萃取装置、旋转蒸发器、高速混合器、色谱柱、微型斯奈德柱。

3.2.试剂

除非另作说明，试剂需用分析纯，水要用蒸馏水或脱离子水或至少同等纯度的水。主要试剂有：正己烷(沸点68～70℃)、试剂级丙酮、二甲基甲酰胺、用二甲基甲酰胺饱和的正己烷、用正己烷饱和的二甲基甲酰胺、砂子(经酸洗并烘干)、无水硫酸钠颗粒、氧化铝(中性，活化)、2％硫酸钠溶液。

4.过程简述：

4.1操作程序

脂肪和有机氯化物的萃取：通用方法见ISO 3890-1:2000, 附件A。牛奶和黄油采用特定的方法。

在分液漏斗中，用10ml正己烷饱和的二甲基甲酰胺(DFM)对25ml己烷溶液进行萃取，摇荡2～3min后，将底部的DFM层放入第2个100ml分液漏斗中。再进一步用2份10ml DFM进行萃取，萃取液合并到一起，用10ml DFM饱和的正己烷进行洗涤。分离出10ml正己烷，再用10ml 正已烷饱和的DFM进行洗涤。抛弃正己烷，将DMF洗涤液加入到装在500ml分液漏斗中的原有30ml DFM萃取物中加入洗涤液。再加入6ml正己烷，200ml硫酸钠溶液摇荡2min。放置20min使之分离，收集正己烷相，用滤纸干燥分液漏斗，并将正己烷相放入装有15ml溶剂的刻度管，再用少量正己烷冲洗分液漏斗，加入管中。

把试管固定到微-snyder柱上，将正己烷萃取物浓缩到约2ml。

向含有溶剂洗脱过的棉毛塞的色谱柱中加入5g制备好的氧化铝浆液。让氧化铝沉积，并在其上盖上30mm无水硫酸钠层。放出正己烷直到弯月面接近硫酸钠层的顶部。加入正己烷萃取物，并用2ml正己烷洗涤。

用50ml正已烷洗，流速不超过5ml/min，用旋转蒸发器收集洗提液，并将其浓缩至约5ml。取下刻度管固定到微型斯奈德柱上，把洗提液浓缩到1ml。

4.2气体色谱

见ISO 3890-1:2000。

4.3确证试验和附加的提纯程序

4.3.1 确证试验A：用玻璃毛细管气相色谱法测定有机氯化物

4.3.2 确证试验B：薄层色谱法测定有机氯化物

4.3.3 确证试验C：化学修正

4.3.4 确证试验D：光化学修正

4.4附加提纯程序

5.精确度：

6.来源：

国际标准化组织，ISO 3890-2：2000(E)