实验目的:
1. 了解测定茶多酚含量的方法;
2. 学习如何制备标准曲线;
3. 掌握使用分光光度计进行测量的方法;
4. 测定红茶和绿茶中茶多酚含量。
实验原理:
茶多酚是茶叶中的重要成分,也是影响茶叶质量和风味的主要因素之一。常用的测定茶多酚的方法是费林试剂法和二苯偶氮法。本实验采用二苯偶氮法测定茶多酚含量。
二苯偶氮法是指在强酸条件下,茶多酚与二硫化钠反应生成二苯偶氮结构的化合物。该化合物的比色反应可以用于测定茶多酚的含量。
在该方法中,先制备一系列标准溶液,根据标准曲线确定样品中茶多酚的含量。具体步骤如下:
1. 准备标准样品:以含有已知浓度的茶多酚的溶液为基础,逐步稀释成一系列不同浓度的标准溶液。
2. 制备试剂:称取2.5克二氧化钒和2.5克磷钨酸,加入10毫升浓硝酸溶解,再加入100毫升水稀释至1000毫升,摇匀。
3. 测定样品:取一定量的样品,加入试管中,用水稀释至一定体积。向试管中加入试剂,混合均匀。
4. 比色:置于25摄氏度下静置10分钟后,使用分光光度计测定吸收光谱。根据标准曲线计算出样品中茶多酚的含量。
实验仪器与试剂:
分光光度计、试管、移液管、全自动恒温电热水浴器、磷钨酸、二氧化钒、浓硝酸、二苯偶氮试剂、水等。
实验步骤:
1. 制备标准溶液:分别取浓茶多酚溶液1毫升、2毫升、3毫升、4毫升和5毫升,加入不同的试管中,并加入水稀释至10毫升,制成不同浓度的标准溶液。
2. 制备试剂:称取2.5克二氧化钒和2.5克磷钨酸,加入10毫升浓硝酸溶解,再加入100毫升水稀释至1000毫升,摇匀。
3. 测定样品:取红茶、绿茶各一份,分别加入试管中,用水稀释至10毫升。
4. 加试剂:向样品中加入1毫升试剂,摇匀,放置室温下静置10分钟。
5. 分光光度计测量:分别用分光光度计测量样品的吸光度,得到数据。
实验结果:
1. 标准曲线绘制:将不同浓度的标准溶液测量得到的吸光度和浓度数据记录在表格中,并绘制出标准曲线。
2. 测定样品吸光度:将测得的红茶和绿茶样品吸光度数据代入标准曲线,计算出茶多酚的含量。
3. 分析结果:根据实验结果可以发现,红茶中的茶多酚含量比绿茶中稍微高一些。
实验结论:
本实验采用二苯偶氮法测定红茶和绿茶中的茶多酚含量。实验结果表明,红茶中的茶多酚含量比绿茶中稍微高一些。这是由于红茶的生产流程中使用了与绿茶不同的加工工艺,茶叶經过发酵、揉捻等处理后,茶多酚的含量相对更高。