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质粒提取步骤及原理

2024-09-08 来源：星星旅游

1、首先，将培养好的细菌离心，收集沉淀。将沉淀加入裂解缓冲液中，使细菌细胞壁破裂，释放出质粒DNA。
2、其次，加入蛋白酶K等蛋白酶，消化蛋白质，与质粒DNA分离开。加入乙醇或异丙醇等沉淀剂，使质粒DNA沉淀。用百分之70乙醇洗涤沉淀，去除残留的盐分和杂质，离心干燥。
3、最后，将干燥的质粒DNA加入适当的缓冲液中，溶解质粒DNA。
4、原理是利用质粒DNA与细菌染色体DNA在大小、结构和物理性质上的差异，通过裂解细菌、去除蛋白质、沉淀质粒DNA等步骤，分离出纯净的质粒DNA。