发布网友 发布时间:2024-10-24 15:02
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热心网友 时间:2024-11-10 00:41
细胞转染是将外源DNA或RNA导入目标细胞的技术,适用于生命科学研究、基因治疗、药物开发等。主要方法包括化学、物理和生物法。稳定转染将外源DNA整合入宿主细胞基因组,通过药物筛选保留表达稳定细胞;而瞬时转染在有限时间内高效表达,但不能稳定遗传。稳定转染所用质粒包含抗性基因,通过药物筛选获得稳定细胞株。瞬时转染不需抗性基因,表达量随时间递减。常用转染方法有物理、化学和生物法,选择取决于细胞类型和研究目的。稳定转染和瞬时转染的差异在于稳定转染细胞株可以遗传,而瞬时转染不能。构建稳转细胞株需要通过药物筛选,周期较长,但表达稳定,批间差异小。构建流程包括重组质粒构建、细胞准备、转染、细胞检测、克隆挑选、克隆检测、细胞建库等步骤。影响转染效率的因素包括质粒浓度、细胞类型、转染方法等。在无法提高转染效率时,建议构建稳转细胞株。选择转染方法需考虑成本、操作复杂性、细胞类型和个性化需求。报告基因细胞株构建与普通细胞株构建过程相似,需选择正确的报告基因质粒,根据细胞类型选择合适的转染方法,并进行药物筛选。翌圣生物提供多种报告基因质粒产品,详情请咨询400-6111-883。