AMAMFSIs0316 藏红花 试验方法
AM-AM-FS-Is-0316
藏红花——第二部分：试验方法
本方法是ISO3622的一部分，适用于香料藏红花的测试，它适合于丝状或粉状藏红花的测定。
3.1.仪器
3.2.主要试剂
4.1.试样的准备：
分丝状和粉状藏红花，分别按表1和表2的次序进行测定。
4.2.组分试验：
4.2.1一般情况
初步测度决定对试样是否进行充分的化学分析，如果藏红花不纯，测试无必要。
4.2.2丝状红花
4.2.2.1原理
用放大镜目测。
4.2.2.2仪器
最大10倍的放大镜。
4.2.2.3程序
展开试样，并用放大镜进行检查。
4.2.2.4结果的解释
所有丝束应属于植物藏红花属，不属于此类样品应丢弃。
4.2.3粉状藏红花
4.2.3.1原理
应用色度反应。
4.2.3.2试剂
试剂只能用分析纯级，水要用蒸馏水或去离子水或同等纯度的水。主要试剂有：硫酸、二苯胺及其溶液。
4.2.3.3仪器
平底瓷盘。
4.2.3.4步骤
称取0.5g藏红花，放入含有二苯胺溶液的瓷盘中。纯藏红花会立即产生蓝色，并很快变成红褐色。产生蓝色是因为生成了硝酸盐。
4.3.丝状藏红花植物性废物含量的测定：
4.3.1原理
对存在于试样中的植物性废物进行物理分离，并称重。
4.3.2仪器
观察玻璃、实验室用小钳子、分析天平。
4.3.3步骤
4.3.3.1试样处理
称取约3g试样，精确至0.01g。
4.3.3.2测定
把试样摊开放在中性的灰纸上，用小钳子分出黄色丝束和其它植物性废物。用分析天平称出干燥观察下班的重量，再把分离出的植物性废物放在其上进行称重，均精确到0.01g。
4.4.丝状藏红花外来物质含量的测定：
4.4.1原理
对试样中的外来物质进行物理分离并称重。
4.4.2仪器
观察玻璃、实验室用小钳子、分析天平。
4.4.3步骤
4.4.3.1试样处理
称取约3g试样，精确至0.01g。
4.4.3.2测定
把试样摊开放在中性的灰纸上，用小钳子从中分离出外来物质。用分析天平称出干燥观察玻璃的重量，再把分离出的外来物质放在其上进行称重，均精确到0.01g。
4.5.粉状藏红花的显微检测：
4.5.1原理
确定粉状藏红花的属性和纯度，并用显微镜研究其解剖学组成。试样溶于蒸馏水，用氢氧化钠或氢氧化钾溶液及水溶性碘/碘化物溶液进行检测。
4.5.2主要试剂
试剂要胜分析纯级，水用蒸馏水或脱盐水或同等质量的水。主要试剂有：碘/碘化物水溶液、氢氧化钠或氢氧化钾溶液。
4.5.3仪器
显微镜及相关设备。
4.5.4步骤
4.5.4.1试样处理
取样量取决于要分析的试样。如试样量较少推荐准备几个载玻片。主要包括试样溶于水；试样溶于氢氧化钠或氢氧化钾溶液；试样溶于碘/碘化物水溶液三种载玻片。
4.5.4.2测定
把准备好的载玻片放在显微镜下观察。
4.5.5藏红花的解剖学结构
观察柱头的剖面图，并进行表征。
4.6.水分和挥发性物质含量的测定：
4.6.1原理
在烘箱中于103℃±2℃下进行烘干，直至恒重。；
4.6.2仪器
常规实验室仪器，主要有：称重盘或挥发盘（带盖或观察玻璃）、烘箱、干燥器、分析天平。
4.6.3步骤
4.6.3.1试样处理
分丝状和粉装分别取样。先和出称重盘或挥发盘的重量，再称取约2.5g试样，均精确至0.001g。
4.6.3.2测定
把装有试样的称重盘或挥发盘，不盖盖，放入烘箱，设定温度为103℃，放置16h。盖好盖或观察玻璃后放入干燥器中冷却，冷却后称重，精确到0.001g。保留烘干后的产品进行总灰分和不溶于酸的灰分的测定。
4.7.总灰分的测定：
按ISO928标准进行测定，对比状和粉状藏红花，试样是测定水分和挥发性物质会计师后的试样，称样量约2g。
4.8.不溶于酸的灰分的测定：
按ISO930标准进行测定，对丝状和粉状藏红花，试样是测定总灰分含量后的残渣物。
4.9.粉碎和筛分：
丝状藏红花，用粉碎机进行粉碎，直至95%的产品通过500µm筛子。
粉状藏红花，用筛子进行筛分，检验是否95%的产品能通过筛子，如不能则需要进行粉碎，以获得要求的颗粒尺寸。
4.10.主要特性（苦藏花素、藏花本醛、藏花素）的测定——光谱法：
4.10.1原理
在室温下记录藏红花水溶性抽提物在220nm处光密度的变化。
4.10.2仪器
常规实验室仪器，主要有：光度计（220nm、480nm）、石英吸收池、容量瓶、移液管、滤膜。
4.10.3步骤
4.10.3.1试样处理
准确称取在观察玻璃上的试样500mg，精确至0.001g。试样移至1000ml容量瓶中，加入900ml蒸馏水，用磁力搅拌器以1000rpm速度搅拌1h。然后用馏水稀释至刻度，盖上盖，混合均匀。
用移液管移取20ml溶液至200ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，盖好盖并混匀。在避光下用滤膜快速过滤，得到清亮的溶液。
4.10.3.2测定
调节好光谱仪，以蒸馏水为参比液，测定滤液在220nm和480nm处吸光度的变化。
4.11.藏红花颜料的鉴定：
4.11.1原理
藏红花用甲醇浸泡，得到的溶液进行薄层色谱分离，对展开的斑点进行测定。
4.11.2试剂
所用试剂除非另作说明均需分析纯级，水用蒸馏水或同等纯度水。主要试剂有：甲醇、乙醇、氯仿、硫酸、4-甲氧基苯甲醛、萘酚黄、苏丹红G、参比溶液、乙酸乙酯/2-丙醇/水洗提液、4-甲氧基苯甲醛/乙醇/硫酸展开剂。
4.11.3仪器
常规实验室仪器，主要有：试管、微型注射器或微型移液管、色谱槽、硅胶板等。
4.11.4步骤
4.11.4.1试样处理
称取约0.05g试样，精确至0.001g。试样移至试管中，加几滴水润湿，等2-3min，然后加入1ml甲醇，溶液避光硅胶板上进行薄层色谱分离。
4.11.4.2测定
用紫外光（254nm），然后用日光进行光谱测定。
国际标准化组织，ISO3632-2：1993（E）